超分辨光學顯微鏡NANOPSISM采用了新一代超分辨辨技術，即固態半球超級透鏡成像技術，突破傳統光學顯微鏡的光學衍射分辨率極限，使顯微鏡的橫向分辨率達到50nm。通過該成像技術，用戶能夠得到超分辨辨率彩圖像并保留光學顯微鏡所有優勢-快速、簡單、無損、完整、真實顏色。在100X浸水物鏡上加裝固態半球超級透鏡裝置，在水平分辨率上可以從原來的200nm提高到50nm，等同于400X物鏡的實際效果。生物醫學成像技術是基礎生物學研究和臨床醫學**重要的工具之一。回顧歷史，已有多位科學家憑借在成像技術方面的突破獲得諾貝爾獎。其中，Ｒoentgen因發現X射線獲得1901年諾貝爾物理學獎;Zernike因發明相襯顯微鏡獲得1953年諾貝爾物理學獎;Ｒuska的電子顯微鏡以及Binning和Rohrer的掃描隧道顯微鏡獲得1986年諾貝爾物理學獎;Lauterbur和Mansfield因發明核磁共振成像技術共同獲得2003年諾貝爾生理醫學獎。在剛剛過去的2014年，諾貝爾獎評審**會再一次肯定成像技術的重要性，將諾貝爾化學獎授予發展超分辨率熒光顯微成像技術的3位科學家。

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由于激發強度隨到焦平面的距離的平方變化， 在 z 軸方向雙光子激發

幾率隨離焦距離的四次方衰減， 熒光團激發只發生在焦點內。 用數值孔徑

為 1.25 的物鏡， 激發波長為 780 納米， 全部激發熒光的 80%被局限在焦平

面 1 微米范圍內， 激發體積大約為 0.1-1 飛升， 與傳統熒光顯微鏡相比，

該體積降低了 1010 倍。

在激光掃描熒光顯微術中， 雙光子激發具有三維層析能力， 該三維層

析效果可與共焦顯微鏡相比擬， 它還比具有另外兩個優勢： 因為照明光在

時間空間上匯聚， 沒有離焦光漂白； 激發光不會被離焦吸收衰減， 因而有

較大的穿透深度。 山西本地顯微鏡聯系方式激光掃描共聚焦顯微鏡價格。

雙色激發比雙光子激發的優勢并不在于較高的分辨率， 而是在于小目

標物經過較大散射媒質后更容易觀察。 事實上， 與雙光子激發比較， 雙色

激發在焦點內熒光散射增加， 而干擾背景熒光只有很小增加。

結合多光子熒光技術， 多光子共聚焦顯微鏡（Multiphoton Excitation

－MPE） 的發展成功的解決了傳統共聚焦顯微鏡（單光子共聚焦顯微鏡）

所存在的問題， MPE 的激光源是超快激光器（多為鈦寶石激光器， 可以達

到皮秒或者飛秒級的掃描速度）， 具有非常高的峰值功率和較低的平均功

率， 從而可以減小或者消除光漂白和光毒作用。 多光子的吸收現象是非線

性效應， 只發生在聚焦焦點處， 不需要共聚焦孔徑光闌濾光， 從而**提

高成像亮度和信噪比。 在傳統激光共聚焦顯微鏡中， 光通過出的所有樣品

都被激發， 所以必須用孔徑光闌來選取焦點處樣品發出的熒光。 孔徑光闌

不僅遮擋了焦點以外樣品發出的熒光， 而且也遮擋了焦點處散射和漫反射

的熒光。 在 MPE 中， 焦點處發出的所有熒光， 包括散射和漫反射的熒光都

可以被收集并探測到。 并且由于多光子實驗所用的激發光的波長較長， 激

發光的散射損失很小， 軸向分辨率更高， 樣品的穿透能力更強

    激光掃描共聚焦顯微鏡(confocallaserscanningmi-croscopy,CLSM)是一種新型高精度的激光源加共聚焦顯微鏡,是利用激光作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察分析對象進行數字圖像處理的一套觀察和分析系統其比較大特點是對標本進行無損傷性的實時觀察分析,得到細胞或結構內部微細結構的熒光圖像,以及在亞細胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號以及細胞形態的變化,對生物標本進行定性、定量、定時和定位研究,具有極大的優越性[1]。主要構件一個完整的CLSM系統由幾個主要的硬件和一些成像分析軟件組成。硬件包括表面熒光顯微鏡、激光光源及冷卻系統、定位掃描裝置、分辨系統、計算機控制系統、顯示器和圖像輸出打印設備。 在哪里可以買到激光掃描共聚焦顯微鏡。

1． 雙光子顯微鏡出現的背景----傳統激光共聚焦顯微鏡的兩大局限:

1） 一是光毒性現象： 因為共聚焦的必須足夠小以獲得辨率的圖像， 而孔徑小又會擋掉很大部分從

樣品發出的熒光， 包括從焦平面發出的熒光， 相應的， 激發光必須足夠強以獲得足夠的信噪比； 而**度

的激光會使熒光染料在連續掃描過程中迅速褪色， 熒光信號會隨著掃描進程度進行變得越來越弱。

2） 光毒作用是另外一個問題， 在激光照射下， 許多熒光染料分子會產生諸如單態氧或自由基等細胞，

所以實驗中要限制掃描時間和激發光的光功率密度以保持樣品的活性。 在針對活性樣品的研究中， 尤其是

活性樣品生長、 發育過程的各個階段， 光漂白和光毒現象使這些研究受到很大的限制。 有人知道雙光子顯微鏡嗎？天津顯微鏡

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2． 為什么說雙光子顯微鏡一般不需要配備紫外激發激光器？

雙光子顯微鏡技術是建立在雙光子激發效應的基礎上的一種熒光激發技術： 熒光染料分子可以同時吸收低

能量的兩個光子而被激發（兩個光子到達熒光分子的時間間隔小于 1 飛秒） ， 其激發效果可以等同于吸收

一個 1/2 波長的高能量光子。 例如， 吸收兩個紅色波長的光子， 相當于一個吸收紫外的分子。 長波長的光

子不易被細胞吸收， 因此對活細胞的光毒性減少， 也降低了光漂白。 這樣即起到紫外激發的功能， 又避免

了紫外光線對樣品的傷害。 陜西光學顯微鏡貨源推薦

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