細胞膜流動性測定細胞膜熒光探針受到極化光線激發后,其發射光極性依賴于熒光分子的旋轉,而這種有序的運動自由度依賴于熒光分子周圍的膜流動性,因此極性測量可間接反應膜的流動性。這種膜流動性測定在膜的磷脂酸組成分析、作用位點、溫度反應測定和物種比較等方面有重要作用。細胞的物理化學動態監測CLSM可對細胞形狀、周長、面積、平均熒光強度及細胞內顆粒數等參數進行自動測定,能對細胞的溶酶體、線粒體、內質網、細胞骨架、結構性蛋白質、DNA、RNA、酶和受體分子等細胞內特異結構的含量、組分及分布進行定量、定性、定時及定位測定。光活化技術生物體內許多重要的活性物質和化合物均可形成籠鎖化合物,在處于籠鎖狀態時,其功能被封閉,而一旦被某特異波長的瞬間光照射后,光活化解籠鎖,使其恢復原有活性和功能,在細胞的繁殖、分化等生物代謝過程中發揮功能。CLSM具有光活化測定功能,可控制籠鎖探針分解的瞬間光波長和照射時間,從而人為控制多種生物活性產物及其他化合物發揮作用的時間和空間。細胞通訊多細胞生物體中,細胞間相互影響和控制的生物學過程稱為細胞間通訊。 激光掃描共聚焦顯微鏡的購買途徑。遼寧新型顯微鏡生產廠家哪家好

雙光子熒光顯微鏡是結合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發技術的一種新技術。

雙光子激發的基本原理是： 在高光子密度的情況下， 熒光分子可以同時吸收 2 個長波長的光子， 在經過一

個很短的所謂激發態壽命的時間后， 發射出一個波長較短的光子； 其效果和使用一個波長為長波長一半的

光子去激發熒光分子是相同的。 雙光子激發需要很高的光子密度， 為了不損傷細胞， 雙光子顯微鏡使用高

能量鎖模脈沖激光器。 這種激光器發出的激光具有很高的峰值能量和很低的平均能量， 其脈沖寬度只有 100

飛秒， 而其周期可以達到 80 至 100 兆赫。 在使用高數值孔徑的物鏡將脈沖激光的光子聚焦時， 物鏡的焦

點處的光子密度是比較高的， 雙光子激發只發生在物鏡的焦點上， 所以雙光子顯微鏡不需要共聚焦， 提

高了熒光檢測效率。 為形態學、 分子細胞生物學、 神經科學、 和藥理學等研究領域中重要的研究手段。 廣西本地顯微鏡批量定制雙光子顯微鏡維修保養。

3． 雙光子顯微鏡的激光器有何特別之處？

雙光子吸收幾率依賴于兩個入射光子在空間和時間上的重合程度（兩個光子必須在 10－18 秒內到達） 。 雙

光子吸收截面很小， 只有在具有很大光子流量的區域的熒光團才會被激發。 因此所用激光器多為鈦寶石激

光器， 可以達到皮秒或者飛秒級的掃描速度， 且具有非常高的峰值功率和較低的平均功率， 從而可以減小

或者消除光漂白和光毒作用。 **主要的是在一個很小的范圍提供非常高密度的光子， 可以保證雙光子的同

時激發。

在空氣的環境下， 用壓電晶體微懸臂的共振頻率或接近這一頻率

來振蕩懸臂， 從而實現了 輕敲模式的成像原理。 當針尖未與表面接觸

時， 壓電的運動產生了 懸臂大振幅的振蕩。 。 振蕩的針尖朝向樣品表面

運動直到針尖開始輕輕地接觸到樣品或敲擊到表面。 微懸臂的振蕩就

會由于針尖與表面接觸引起的能量的損失而必然地下降。 這種振幅交

替下降用于檢測并測量表面形貌。

檢測器測量到這些交替變化的振幅值, , 再通過反饋回路, , 調整針尖

與樣品之間的距離， 保證振幅恒定在某一個恒定值, , 這樣針尖在掃描

過程中的運動軌跡就反映了 樣品的表面形 貌 激光掃描共聚焦顯微鏡哪里買到？

激光共聚焦顯微鏡在進行生物樣品研究工作中還存在很多局限和問

題：

一是標記染料的光漂白現象。 因為共焦孔徑光闌必須足夠小以獲得高

分辨率的圖像， 而孔徑小又會擋掉很大部分從樣品發出的熒光， 包括從焦

平面發出的熒光， 相應的， 激發光必須足夠強以獲得足夠的信噪比； 而高

強度的激光會使熒光染料在連續掃描過程中迅速褪色， 熒光信號會隨著掃

描進程度進行變得越來越弱。

光毒作用是另外一個問題， 在激光照射下， 許多熒光染料分子會產生

諸如單態氧或自由基等細胞， 所以實驗中要限制掃描時間和激發光的

光功率密度以保持樣品的活性。 在針對活性樣品的研究中， 尤其是活性樣

品生長、 發育過程的各個階段， 光漂白和光毒現象使這些研究受到很大的

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2． 為什么說雙光子顯微鏡一般不需要配備紫外激發激光器？

雙光子顯微鏡技術是建立在雙光子激發效應的基礎上的一種熒光激發技術： 熒光染料分子可以同時吸收低

能量的兩個光子而被激發（兩個光子到達熒光分子的時間間隔小于 1 飛秒） ， 其激發效果可以等同于吸收

一個 1/2 波長的高能量光子。 例如， 吸收兩個紅色波長的光子， 相當于一個吸收紫外的分子。 長波長的光

子不易被細胞吸收， 因此對活細胞的光毒性減少， 也降低了光漂白。 這樣即起到紫外激發的功能， 又避免

了紫外光線對樣品的傷害。 遼寧新型顯微鏡生產廠家哪家好

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