微管重組技術是體外構建紡錘體模型的基礎。通過在體外重組微管蛋白，可以形成類似于細胞內紡錘體的微管結構。常見的方法包括：從牛腦或其他來源中純化微管蛋白，確保其純度和活性。在體外條件下，通過控制溫度、離子濃度等參數，誘導微管蛋白組裝成微管。使用微管穩定劑（如紫杉醇）或調節蛋白（如MAPs）穩定微管結構，模擬細胞內的微管動態變化。動力蛋白和調節蛋白是紡錘體功能的重要組成部分。通過在體外模型中添加這些蛋白，可以模擬紡錘體的動力學行為。常見的方法包括：添加動力蛋白（如dynein、kinesin）以模擬微管的運動和動力學行為。添加調節蛋白（如AuroraB、Mad2）以模擬紡錘體檢查點的功能。紡錘體的形成與細胞骨架的重構密切相關。卵母細胞紡錘體Oosight Basic

紡錘體是卵母細胞在減數分裂過程中形成的一種微管結構，負責精確分離染色體。然而，紡錘體對環境溫度、滲透壓等外部條件極為敏感，在冷凍保存過程中容易發生損傷，導致染色體分離異常，進而影響卵母細胞的發育潛力和受精后的胚胎質量。因此，如何有效監測和評估冷凍過程中紡錘體的變化，成為紡錘體卵冷凍研究的重要課題。紡錘體實時成像技術的出現，為這一問題的解決提供了可能。紡錘體實時成像技術主要利用高分辨率顯微鏡結合熒光標記技術，對卵母細胞內的紡錘體進行實時、動態的觀察和記錄。常用的熒光標記方法包括使用綠色熒光蛋白（GFP）標記微管蛋白，以及利用特定抗體對紡錘體相關蛋白進行染色。通過這些方法，研究者可以清晰地觀察到紡錘體的形態、位置、動態變化等信息，從而準確評估冷凍過程中紡錘體的穩定性和完整性。美國克隆紡錘體Oosight Basic紡錘體的形成和功能受到多種信號分子的調控，如生長因子等。

玻璃化冷凍技術因其快速冷凍和解凍的特點，在哺乳動物紡錘體卵冷凍保存中展現出巨大優勢。該技術通過極快的降溫速率和高濃度的冷凍保護劑，使細胞內溶液在冷凍過程中呈玻璃態而非結晶態，從而避免了冰晶對紡錘體的損傷。此外，研究者們還嘗試將微流控技術、激光輔助冷凍等新技術應用于卵母細胞的冷凍保存中，以進一步提高冷凍效果。為了準確評估冷凍對紡錘體的影響，研究者們開發了多種紡錘體穩定性評估技術。例如，通過偏光顯微鏡觀察紡錘體的形態變化；利用免疫熒光染色技術檢測紡錘體相關蛋白的分布和表達；以及通過分子生物學方法檢測紡錘體相關基因的轉錄和翻譯水平等。這些技術的應用為深入研究冷凍過程中紡錘體的變化提供了有力支持。

如何觀察紡錘體呢？在普通光學顯微鏡下，人類卵母細胞是半透明的，無法對紡錘體的結構進行觀察和分析。傳統方法是用一種特異的DNA熒光染料對卵母細胞染色，在紫外光下可顯示紡錘體，這種免疫熒光方法對卵母細胞有損傷，不能應用于臨床。為了更好的觀測紡錘體，美國海洋生物學實驗室的R．Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性，開發出偏振光顯微鏡。現今，偏振光顯微鏡已經發展成為一種無創性的觀察和分析紡錘體動態結構的顯微觀測系統，我們也叫它紡錘體觀測儀。它不僅能對雙折射性紡錘體信號的有無進行定性分析，還能對信號的強弱進行定量分析。紡錘體微管網絡的復雜性保證了染色體分離的準確性。

阿爾茨海默病患者中，微管蛋白（如tau蛋白）的突變和異常磷酸化會影響微管的穩定性和紡錘體的組裝，導致染色體分離異常和細胞周期紊亂。紡錘體功能障礙會導致染色體不穩定，增加基因組的不穩定性，進而影響神經元的正常功能和存活。正常情況下，成熟的神經元處于G0期，不會重新進入細胞周期。然而，阿爾茨海默病患者中，神經元可能會重新進入細胞周期，但由于紡錘體功能障礙，無法完成正常的細胞分裂，導致細胞凋亡。在神經元中，紡錘體的正常功能對于神經元的發育、分化和維持至關重要。紡錘體微管與細胞內的其他細胞器存在復雜的相互作用。美國MII期紡錘體Oosight Meta

紡錘體微管的數量和分布隨細胞分裂階段而變化。卵母細胞紡錘體Oosight Basic

紡錘體成像技術的中心在于提高成像的分辨率和速度，以捕捉紡錘體的精細結構和動態變化。以下是幾種主要的紡錘體成像技術的技術原理：結構光照明顯微鏡（SIM）：SIM通過引入已知的空間調制光場，使樣品發出具有特定空間頻率的熒光信號。通過采集多個不同空間頻率的熒光圖像，并利用算法進行重建，SIM可以實現超越傳統熒光顯微鏡分辨率的成像。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還保持了較快的成像速度和較好的細胞活性。受激輻射損耗顯微鏡（STED）：STED利用一束聚焦的激光束（稱為STED束）來抑制樣品中特定區域的熒光信號。通過精確控制STED束的位置和強度，STED可以實現超越衍射極限的成像分辨率。這種方法特別適用于觀測紡錘體等復雜結構中的精細細節。單分子定位顯微鏡（SMLM）：SMLM通過檢測樣品中單個熒光分子的位置來實現高分辨率成像。由于熒光分子的隨機閃爍特性，SMLM可以在時間域上分離不同分子的熒光信號，從而實現對單個分子的精確定位。這種方法不僅提高了成像的分辨率，還提供了對紡錘體中單個微管和蛋白質分子的動態變化的觀測能力。卵母細胞紡錘體Oosight Basic