在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。Ham’s F-12營養混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養混合物為基礎設計而成的。重慶醫用細胞培養基廠家
無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。重慶醫療細胞培養基供應商家Fischer’s培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。
CMRL培養基是由康諾特醫學研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設計出來的,初用于L細胞(Earle)的無血清培養。CMRL培養基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細胞的克隆培養以及其他哺乳動物細胞系的培養。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和。
DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養基,在細胞培養領域占據著極為重要的地位。它源于經典的 Eagle 培養基,經科學家 Dulbecco 改良優化后,煥發出全新活力。DMEM 培養基成分豐富,氨基酸濃度是原始 Eagle 培養基的兩倍,還涵蓋了非必需氨基酸,為細胞蛋白質合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養基的四倍之多,積極參與細胞內各類代謝反應,助力細胞維持正常生理功能。同時,培養基中包含酸,這一糖酵解途徑的關鍵物質,在細胞能量供應方面發揮著重要作用,時刻為細胞的生命活動提供動力支持。Dulbecco’s 改良培養基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現已廣應用于各種細胞的培養。
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產,例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。不含葡萄糖的培養基可以根據研究需要,隨意調節葡萄糖的濃度,方便快捷。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 MEM培養基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,主用于貼壁細胞培養,修改后也可用于其他細胞培養。湖北RPMI-1640細胞培養基檢測
高糖 DMEM 適合生長快、粘附低的細胞,如腫瘤細胞的培養 。重慶醫用細胞培養基廠家
DMEM 培養基在細胞毒性測試中發揮著重要作用。在評估藥物、化合物或化妝品對細胞的毒性影響時,將細胞置于 DMEM 培養基中,再加入待測試物質??蒲腥藛T通過觀察細胞在含測試物質的 DMEM 培養基中的生長狀態、形態變化、增殖能力以及細胞死亡情況等指標,判斷測試物質的細胞毒性強弱。比如,在新藥研發初期,利用 DMEM 培養基進行細胞毒性測試,可初步篩選出細胞毒性較低的藥物候選物,減少后期研發風險,為新藥研發的安全性提供重要保障。重慶醫用細胞培養基廠家
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