無縫克隆的原理:在載體末端和引物末端應具有15-25個同源堿基(同源臂)。通過T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶,三種酶同時發揮功能,從而達到單片段或多片段與載體連接的技術。T5核酸外切酶:5‘→3’端消化DNA片段,形成粘性末端;DNA聚合酶...
動物疾病模型主要用于實驗生理學、實驗病理學和實驗學(包括新藥篩選)研究。人類疾病的發展十分復雜,以人本身作為實驗對象來深入探討疾病發生機制,推動醫藥學的發展來之緩慢,臨床積累的經驗不僅在時間和空間上都存在局限性,而且許多實驗在道義上和方法上也受到限制。而借助于...
實驗期間每天進行陰道涂片,觀測動情周期變化。進一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側卵巢臟器系數。進一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細胞涂片法,使...
建立肝動物模型的主要方式有二乙基亞硝胺(DEN)誘發大鼠肝4-二甲基氨基偶氮苯(DBA)誘發大鼠肝。用2-乙酰氨基酸(2AAF)誘發大鼠肝。用亞氨基偶氮甲苯(OAAT)誘發大鼠肝。用黃曲霉素誘發大鼠。2、胃:制備胃動物模型的主要方式有①甲基膽蒽(MC)誘發小鼠...
建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義?,F有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足,或與臨床實際病變部位有一定差距,如慢性坐骨神經結扎模型;或操作難度大,對動物損傷重,如自體髓核移植模型,選擇性神經根結扎模型。因此,急需一...
在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激...
病毒包裝技術服務病毒包裝技術服務(DH0010)一、服務介紹重組病毒以其高效和多樣性,是非常有效的將外源基因導入細胞的方法。慢病毒腺病毒腺病毒相關表達特點穩定表達瞬時表達瞬時表達是否整合到基因組是否否免疫原性弱強弱病毒**力高很高高注:高濃度時可能有極少量整合...
細胞轉染技術服務細胞轉染實驗技術服務(DH0002)一、服務介紹細胞轉染(Transfection)是指將DNA或者RNA導入真核細胞中的過程。轉染的目的是產生重組蛋白,或特異性增強或控制轉染細胞中的基因表達。常規轉染技術可以分為兩大類,一類為瞬時轉染,一類為...
細胞增殖通俗點講,細胞增殖也就是細胞分裂,就像我們每個人的生命起點都是由一個受精卵不斷的分裂而來,然后形成由非常多的細胞組成的個體,當然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細胞出現,這就是細胞增殖。增殖是生物體生長、發育、繁殖及遺傳的基礎。大家了解細胞增殖說明了什么...
流式細胞周期檢測試劑盒是一種用于研究細胞周期的重要工具。接下來就跟著上海東寰一起來看看吧~細胞周期是細胞生命周期中的一個重要階段,它包括細胞的生長、DNA復制和細胞分裂等過程。了解細胞周期對于研究細胞生物學以及藥物篩選等方面具有重要意義。流式細胞周期檢測試劑盒...
食品中的大腸桿菌進行快速準確的檢測已成為了人們經常關注的問題。下面闡述食品中的大腸桿菌檢測的方法及分析。發酵法這種方法主要是在℃下的培養基上進行大腸桿菌的培養,該培養基含有熒光底物,需要培養24h。然后對熒光底物進行釋放,需要采用葡萄糖醛酸進行,讓培養基能夠在...
血管生長是發生的關鍵步驟。無論原發性還是繼發性,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成,這是由于細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。由于組織這種新生血管結構及功能異常,且血管基質不完善,這種微血管容易發生滲漏,因此細胞不需經過復雜的侵襲過程而直接穿透...
流式細胞周期檢測試劑盒是一種用于研究細胞周期的重要工具。接下來就跟著上海東寰一起來看看吧~細胞周期是細胞生命周期中的一個重要階段,它包括細胞的生長、DNA復制和細胞分裂等過程。了解細胞周期對于研究細胞生物學以及藥物篩選等方面具有重要意義。流式細胞周期檢測試劑盒...
建議按照2×106每孔的數量將293T細胞均勻鋪入。(2)第二天:在24小時之內,觀察293T細胞的匯合度在90%~95%之間時,向其中加入DNA-脂質體復合體,DNA-脂質體復合體制備方法如下:a)輕輕混勻LipoMax,根據說明書加入相應量于500μlOp...
注意事項1.病毒包裝的幾個關鍵點主要包括:細胞因素、載體系統(盡量使用成熟的商業化載體系統)、構建重組的質粒正確與否、質粒抽提純化情況、包裝轉染控制(24、48小時的細胞及熒光狀態判斷)、目的基因對病毒包裝影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等都會影響到是否...
使其形成利于核酸進入的微孔。C.逆轉錄病毒(RNA):通過病毒中膜糖蛋白和宿主細胞表面的受體相互作用進入宿主細胞,之后反轉錄酶啟動合成DNA并隨機整合到宿主基因組中。特點:穩定轉染,可用于難轉染的細胞、原代細胞,體內細胞等,但攜帶基因不能太大。D.腺病毒(雙鏈...
流式細胞檢測工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代先進的細胞定量分析技術之一,下面就由上海東寰給大家簡要...
上期我們主要講解了細胞凋亡的早期檢測方法,這期主要講解一下細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200bp的DNA的片段。1、凋亡DNALadder檢測試劑盒細胞經處理后,采用常規方法分離提純DN...
建議按照2×106每孔的數量將293T細胞均勻鋪入。(2)第二天:在24小時之內,觀察293T細胞的匯合度在90%~95%之間時,向其中加入DNA-脂質體復合體,DNA-脂質體復合體制備方法如下:a)輕輕混勻LipoMax,根據說明書加入相應量于500μlOp...
一、原理在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上,用微量頭或其它硬物在細胞生長的區域劃線,去除部分的細胞,然后繼續培養細胞至實驗設定的時間,取出細胞培養板,在顯微鏡下觀察并拍照記錄特定位置細胞的生長遷移能力。通過不同分組之間的細胞對于劃痕區修復能力的不同,可以判...
細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU細胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復制期間的EdU,借助熒光檢測工具即可準確地檢測出新增殖的細胞,快速統計處于S期的細胞百分數,分析細胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增...
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發現,EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創新方法。但是,現在依然有很多研究者...
EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發...
EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊...
EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊...
這一類細胞增殖用熒光標記采用溫和的點擊實驗方案,準確且兼容各種抗體實驗方案,整個實驗可在30分鐘內完成,在結果的數據豐富程度方面,堪比多重分析方法。此外,該方法適用于培養的細胞或組織切片,可用流式細胞術分析檢測EdUFlowCytometryKit594(BC...
細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢...
EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。本試劑盒可以檢測到細胞或組織...
細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在DNA復制時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中,基于Apollo...