1、取細胞縣液100u加入Transwel小室。2、24孔板下室一般加入600u含20S的培養基,特別注意的是,下層培養液和小室間常會有氣泡產生,一旦產生氣泡,下層培養液的趨化作用就減弱其至消失了,在種板的時候要特別留心,一旦出現氣泡,要將小室提起,去除氣泡,...
把培養瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預熱完全培養基,用吸管取培養液吹打瓶壁細胞,使其脫離瓶壁形成單細胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入5ml預熱完全培養基,吹打重懸細胞用細胞計...
血管生長是發生的關鍵步驟。無論原發性還是繼發性,一旦生長直徑超過1~2mm,都會有血管生成,這是由于細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。由于組織這種新生血管結構及功能異常,且血管基質不完善,這種微血管容易發生滲漏,因此細胞不需經過復雜的侵襲過程而直接穿透...
上期我們主要講解了細胞凋亡的早期檢測方法,這期主要講解一下細胞凋亡晚期中,核酸內切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產生大量長度在180-200bp的DNA的片段。1、凋亡DNALadder檢測試劑盒細胞經處理后,采用常規方法分離提純DN...
操作時戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學通風櫥里進行。(又稱為二甲基亞砜)毒性級別:★★★實驗場景:常用于細胞培養中的凍存,它可以破壞氫鍵的形成,從而防止冰晶的形成對細胞造成傷害,也是實驗室中比較常用的有機溶劑。防護攻略:存在嚴重的毒性作用,具有血管毒性和肝腎...
如何判斷是否加入了合適體積的Matrigel:我們只需用一張格子紙就能知道自己的移液調整到多少能正好把下孔填滿。如上圖所示,垂直透過每個孔看下面的格子紙,如果格子被縮小了,那么就說明膠沒加滿,格子被放大了,那么膠就加多了,格子沒發生什么變形,這才是剛剛加滿下孔...
由于RNA酶是無處不在的,所以需要加入DEPC使RNA酶失活,阻止RNA的降解。防護攻略:可滅活各種蛋白質,是RNA酶的強抑制劑。DEPC是一種潛在的致物質,在操作中應盡量在通風的條件下進行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強,但吸入的毒性是強的,使用時戴...
f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtc...
引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現要素:針對上述現有技術,本發明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并...
細胞周期和凋亡技術服務(DH0003)一、服務介紹細胞周期(CellCycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,細胞的遺傳物質復制并均等地分配給兩個子細胞。細胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、...
也可以挑去單克隆細胞株進行進一步培養,以得到滿意的穩定表達目的基因的細胞株。6)使用qRT-PCR和Westernblot的方法檢測目的基因的表達量和蛋白水平是否顯著提高。7)由此可得三組細胞株:a.正常細胞株;b.空載病毒載體的細胞株;c.過表達目的基因的病...
具體選用何種培養器皿取決于細胞生長密度需求(啟動正常生長所需的密度)。二.細胞換液培養1、全量換液:把所有的舊培養液移除,加入新的培養液(加入培養基的量根據細胞的密度和生長速度);2、半量換液:把舊培養液移至15ml離心管中,然后在培養器皿中加入適量新培養基(...
特發性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立一、目的:博萊霉素致肺纖維化模型建立二、材料:博萊霉素藥液配制:4mg/ml();三、方法:1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實驗臺上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管;2、...
把培養瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細胞飄起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預熱完全培養基,用吸管取培養液吹打瓶壁細胞,使其脫離瓶壁形成單細胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入適量(消化前預估細胞的數量,1-2*10E...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組...
機械通氣致肺損傷模型實驗動物:兔子、大鼠獲得方式:使用呼吸機,予以特定的通氣模式(例如:大鼠接受20mL/Kg的潮氣量、85次/min的呼吸頻率2h)模型特點:急性肺損傷病理特征之一的透明膜常出現于大型的實驗動物模型,而在大鼠或小鼠中很少出現,因此進行機械通氣...
動物模型名稱:酒精誘導的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-160g6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:用酒精誘導法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米...
在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激...
實驗第21天起將小鼠置于霧化激發器內,給予2%OVA生理鹽水霧化激發,1次/d,每次30min,連續7天,將小鼠呼吸急促,搔鼻抓癢、嗆咳煩躁、點頭運動等作為小鼠模型成功的標準。正常對照組以生理鹽水代替OVA腹腔注射和霧化激發,操作同上所述。6.2模型鑒定及后續...
由于RNA酶是無處不在的,所以需要加入DEPC使RNA酶失活,阻止RNA的降解。防護攻略:可滅活各種蛋白質,是RNA酶的強抑制劑。DEPC是一種潛在的致物質,在操作中應盡量在通風的條件下進行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強,但吸入的毒性是強的,使用時戴...
放血致失血性貧血小鼠模型放血致失血性貧血小鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務...
如發生與發展、抗原呈遞、免疫調節、組織愈合等。此外,外泌體與疾病的研究表明:外泌體可能在代謝性疾病的出現以及心血管健康中發揮作用。外泌體生物發生和神經元細胞中分泌小泡的調節之間的交集為外泌體和神經退行性疾病的發病機制之間假定的聯系提供了新的見解。與研究外泌體在...
無論是學術大牛還是科研小白,在接觸一個新課題時,往往是三個步驟:首先,閱讀大量相關文獻,設計出自己的實驗方案。然后,摸索預實驗,獲得一些經驗和數據。根據這些資料,決定是否推進正式試驗。其中,很重要的預實驗不僅能節約實驗經費,減少人力物力支出,重要的是,...
動物模型名稱:皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上...
腰椎間盤突出是造成全球大部分地區工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經成為臨床脊柱外科的常見病和多發病,而且發病人群越來越呈現年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導致腰椎纖維環出現變形、破裂...
無縫克隆的原理:在載體末端和引物末端應具有15-25個同源堿基(同源臂)。通過T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶,三種酶同時發揮功能,從而達到單片段或多片段與載體連接的技術。T5核酸外切酶:5‘→3’端消化DNA片段,形成粘性末端;DNA聚合酶...
原理過表達穩定細胞系(OverexpressionStableCellLines)的構建利用慢病毒轉染、電轉等技術手段將特定的基因序列整合到宿主細胞的染色體上,使得目的基因能夠在宿主細胞內長期且穩定的表達。用途基因功能研究、免疫/殺傷/增殖等、抗體藥物的活性篩...
通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調節作用。附圖說明圖1為本發明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質粒載體的構建圖;圖2為本發明pirb基因敲入的小鼠模型的構建方...
實驗介紹細胞遷移與侵襲實驗將Transwel小室放入培養板中,小室內稱上室,培養板內稱下室,上下層培養液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細胞種在上室內,由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養液中的成分可以影響到上室內的細跑,應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進...
日久天長,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發生轉化獲得不死性,變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此,培養中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,它們既保持著與體內細胞相同的基本結構和功能,也有一些不同于體...