重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白(SpCas9)是一種用于基因組編輯的核酸酶。它是CRISPR-Cas系統的一部分,該系統是一種細菌和古菌的適應性免疫防御機制,能夠識別并切割入侵的外源核酸。Cas9蛋白在CRISPR系統中起到關鍵作用,它能夠識別特定的原間隔子相...
支持IND(InvestigationalNewDrug,新藥臨床試驗申請)的GMP蛋白生產技術服務在臨床前研究中扮演著至關重要的角色。GMP,即GoodManufacturingPractice(良好生產規范),是一套適用于制藥等行業的強制性標準,確保產品質...
Fc融合蛋白技術通過將Fc片段(免疫球蛋白G的恒定區)融合到目標蛋白上,可以帶來以下提高蛋白穩定性的優勢:1.**提高溶解度**:Fc片段通常具有較高的溶解性,能夠減少目標蛋白的聚集,從而提高其在細胞內的溶解度。2.**延長半衰期**:Fc片段具有較長的體內半...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F,Peptide-N-glycosidaseF),也稱為N-糖酰胺酶F,是一種用于糖蛋白研究的酶,它可以從糖蛋白的N-連接糖鏈上去除糖基。以下是PNGaseF的一些關鍵特性和應用:1.**作用機制**:PNGaseF能夠特異性地...
使用PreScissionProtease進行蛋白質切割后,可以采用以下方法來提高產品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據蛋白質的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換...
通過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)和Westernblot(西方印跡)可以有效地檢測帶有His標簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進行這些檢測的步驟:###SDS-PAGE步驟:1.**樣品準備**:-將重組泛素蛋白溶解在適當的緩沖液中,通常含有還原劑...
漢遜酵母表達系統是一種新型的酵母菌表達平臺,它具有高密度培養和高效表達外源蛋白的能力。在臨床前研究中,漢遜酵母被用于表達瘤病毒(HPV)病毒樣顆粒(VLPs),這為開發HPV疫苗提供了一種有希望的策略。HPVB19是一種高度傳染性的病毒,對免疫功能低下者和胎兒...
熒光光譜分析是一種強大的技術,可以用來優化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發和發射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發和發射光譜,以確定其比較大激發波長和比較大發射波長。-...
通過SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)和Westernblot(西方印跡)可以有效地檢測帶有His標簽的泛素蛋白的純度和完整性。以下是進行這些檢測的步驟:###SDS-PAGE步驟:1.**樣品準備**:-將重組泛素蛋白溶解在適當的緩沖液中,通常含有還原劑...
SpCas9蛋白(來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用:1.**識別和結合**:SpCas9蛋白與一個單導向RNA(sgRNA)結合,形成RNP復合...
EndoS酶在抗體藥物偶聯物(ADCs)研究中的具體應用主要體現在糖鏈定點偶聯技術方面。根據上海藥物研究所的研究進展,EndoS酶被用于實現定點ADC化合物的“一步”制備,這是一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略。該策略利用了新穎截短型糖結構的藥物-連接子和野生型...
EndoS糖苷內切酶S在抗體藥物偶聯物(ADCs)研究中的應用主要體現在糖鏈定點偶聯技術上。通過上海藥物所的研究,開發了一種新穎的糖鏈定點ADC制備策略,利用EndoS2這種糖苷內切酶,可以將小分子細胞毒藥物“一步”定點連接到抗體的糖基化位點,實現了糖鏈定點A...
重組人血清白蛋白(rHSA)是通過植物表達系統生產的細胞培養級產品,在科研領域有著廣泛的應用。以下是rHSA在科研中的一些主要應用:1.**細胞培養**:rHSA是細胞培養中的重要成分,它可以作為血清替代品,促進細胞生長和維持細胞培養環境的穩定性。由于其無動物...
在蛋白質糖基化分析中,除了N-糖苷酶F(PNGaseF),還有其他幾種酶也發揮著重要作用,具有各自的優勢:1.**EndoH糖苷內切酶H**:這種酶可以水解高甘露糖型N-連接糖鏈,通常用于區分高甘露糖型和復雜型糖鏈。2.**EndoS糖苷內切酶S**:Endo...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F)是一種普遍使用的酶,它可以從N-連接糖蛋白中去除幾乎所有類型的N-連接糖鏈。其活性和穩定性可能會在不同的pH條件下發生變化。根據NEB(NewEnglandBiolabs)提供的PNGaseF產品信息,PNGaseF的好的活性...
SpCas9蛋白(來自化膿性鏈球菌的Cas9蛋白)在基因編輯中的主要作用是作為核酸酶,能夠精確地切割目標DNA序列。以下是SpCas9在基因編輯中的幾個關鍵步驟和作用:1.**識別和結合**:SpCas9蛋白與一個單導向RNA(sgRNA)結合,形成RNP復合...
PNGaseF(肽-N-糖苷酶F)是一種普遍使用的酶,它可以從N-連接糖蛋白中去除幾乎所有類型的N-連接糖鏈。其活性和穩定性可能會在不同的pH條件下發生變化。根據NEB(NewEnglandBiolabs)提供的PNGaseF產品信息,PNGaseF的好的活性...
熒光光譜分析是一種強大的技術,可以用來優化重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)的熒光特性。以下是通過熒光光譜分析來優化EGFP熒光特性的步驟:1.**確定激發和發射波長**:-使用熒光光譜儀測量EGFP的激發和發射光譜,以確定其比較大激發波長和比較大發射波長。-...
EndoS,即糖苷內切酶S(Endo-S),是一種具有高度特異性的酶,它在生物化學研究中有著重要應用,尤其是在糖蛋白和抗體藥物偶聯物(ADCs)的研究中。以下是EndoS的一些關鍵特點:1.**特異性**:EndoS能夠特異性地識別并切割N-連接糖鏈的殼二糖結...
EndoS糖苷內切酶在抗體藥物偶聯物(ADCs)的制備中發揮著至關重要的作用。EndoS是一種特異性的內切糖苷酶,它能夠從IgG重鏈的N-糖基中切割N-連接的糖鏈。這種特異性使得EndoS在改造抗體的糖鏈結構時非常有用,尤其是在開發定點ADCs時。在ADCs的...
NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**...
使用PreScissionProtease進行蛋白質切割后,可以采用以下方法來提高產品的純度:1.**親和層析**:利用GST標簽或His標簽等進行一步或多步親和層析,以高純度分離目的蛋白。2.**離子交換層析**:根據蛋白質的電荷特性,使用陽離子或陰離子交換...
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩定性是一個關鍵的挑戰。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩定性的...
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)在實際應用中具有以下優勢:1.**高比活性**:具有高達750,000U/mL的比活性,這表明該酶在催化反應中具有很高的效率。2.**快速反應**:新型的FastPNGaseF能在數分鐘內完成徹底且無偏好性的去糖基化...
在進行IdeSProtease的分子改造時,平衡酶的活性和穩定性是一個關鍵的挑戰。以下是一些策略,這些策略可以幫助研究者在提高酶穩定性的同時保持或甚至提高其催化活性:1.**定向進化**:使用定向進化技術進行多輪的突變和篩選,以獲得在所需條件下具有改進穩定性的...
大腸桿菌表達的重組抑肽酶(Aprotinin)是一種通過基因工程技術在大腸桿菌中生產的蛋白酶抑制劑,具有以下特性和應用:1.**來源**:重組抑肽酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統生產的,確保了無動物源性成分,減少了病毒污染的風險。2.**結構**:它是...
酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,具有以下特點:1.**高效性**:PNGaseF是去除幾乎所有N-連接寡糖從糖蛋白中有效的酶法方法。它能夠在幾分鐘內快速且無偏倚地釋放所有的N-糖鏈,適合后續的色譜或質譜分析。2.**重組酶**:該...
IdeSProtease是一種免疫球蛋白G(IgG)特異性降解酶,它能夠在IgG的鉸鏈區下方的一個特定位點進行切割,產生F(ab')2和Fc片段。這種酶是通過大腸桿菌(E.coli)表達系統重組表達生產的,并且經過分子改造,使其具有更高的酶活和更廣的底物特異性...
重組Exendin-4是一種基于Exendin-4的重組蛋白,Exendin-4是一種從墨西哥蜥蜴(Gilamonster)的毒液中分離出來的39個氨基酸的多肽。它與胰高的血糖素樣肽-1(GLP-1)具有53%的序列同源性,并與相同的膜受體相互作用。重組Exe...
NLS-Cas9-EGFPNuclease是一種融合蛋白,由Cas9核酸酶、核定位信號(NLS)和EGFP(綠色熒光蛋白)組成。這種融合蛋白的特點和科研應用如下:**特點:**1.**無DNA污染**:系統不添加外部DNA,降低了外源DNA污染的風險。2.**...