細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。無血清細胞凍存液產品性能：細胞凍存是細胞實驗中的一個常規技術。北京無血清細胞凍存液生產廠家

細胞凍存經驗談:選對凍存培養基才是王道：研究人員經常需要冷凍細胞并保存，以供后續實驗或臨床使用。基本過程相當簡單：慢慢冷凍細胞，將凍存管放入液氮中，并在需要時快速解凍。凍存培養基能支持細胞并防止冰晶形成。不過，Malfavon的體驗告訴我們，使用不同的凍存培養基，結果那可是大不同。一些經驗老道的研究人員自己制備凍存培養基。不過，那些面對脆弱細胞（比如原代和多能細胞）的研究人員，則更喜歡購買標準化的商業產品。一些非常敏感的細胞系也許能從添加物中受益，以避免細胞在解凍時凋亡。南昌無血清細胞凍存液廠家即用型產品，4℃可穩定保存。

細胞凍存秘籍：細胞凍存對于大多數動物細胞，通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統。如果沒有程序降溫系統，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜。雖然這種方法適用于許多細胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復的冷卻，不建議用于珍貴細胞。無論使用哪種冷卻方法，重要的是快速高效地將其傳輸到較終存儲位置。如果轉移不能立即完成，可以將小瓶置于干冰上一段時間。這樣可以避免在轉移過程中發生溫度升高而損害細胞。在這個轉移過程中溫度升高是解凍后影響細胞活力的主要原因。

細胞凍存的注意事項：1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些，骨髓干細胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開始時，下降速度不能超過－10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大，要依細胞而定，初代培養細胞用DMSO較好，一般細胞可用甘油；用量以較小為好。有人認為人皮膚上皮細胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應再復蘇培養一次，然后再繼續凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍壞。5、注意自身的安全，對于來自人源性或病毒傳染的細胞株應特別小心。操作過程中，應避免引起氣溶膠的產生，小心有毒性試劑例如DMSO，并避免尖銳物品傷人等。無血清細胞凍存液用途：無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、有文獻表明，細胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙，因為這一速度可以很好的控制細胞內部晶體的產生。我們實際操作不可能將速度控制的這么精確，目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉入液氮中。2、正常情況下，經過-20℃1h30min這一步后，凍存管內的細胞已經處于凝固狀態，如果此時凍存管內還是液體，很可能是DMSO或冰箱冷凍功能出現了問題。如若遇到這種情況，不能因為時間到了，就把把液體狀態的凍存管放置到液氮中，可以適當延長在-20℃環境下的冷凍時間30-60分鐘，直至凍存液凝固后再放到液氮中。凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱，穩定保存數年。北京正規無血清細胞凍存液廠家直銷

細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。北京無血清細胞凍存液生產廠家

無血清細胞凍存液使用方法：選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1）按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2）按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4）加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。5）將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6）直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱，長期冷凍保存。北京無血清細胞凍存液生產廠家