原代肝細胞培養中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細胞培養是一種常用的實驗方法，但在培養過程中，細胞可能會受到endotoxin的污染，這會影響實驗結果的準確性。 endotoxin是一種由細菌產生的有毒物質，可以引起炎癥反應和細胞損傷。在原代肝細胞培養中，endotoxin可能來自于培養基、細胞培養器具或細胞本身。因此，需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑，例如聚陽離子樹脂（Polyclonal Cationic Resin，PCR）或聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）。這些去除劑可以吸附endotoxin，從而減少其對細胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單，只需要將其加入培養基中，然后將細胞培養在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養基中的endotoxin含量。如果檢測結果顯示endotoxin含量較高，可以考慮更換培養基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外，還可以采取一些預防措施來減少endotoxin的污染。例如，使用無菌技術操作、定期更換培養器具和培養基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細胞培養中必須注意的問題。采取適當的措施可以減少endotoxin的污染，保證實驗結果的準確性。原代肝細胞可以用于新藥研發企業有關藥物代謝、毒理、靶向誘導相關的實驗，是有效的體外實驗模型。廣東魚原代肝細胞培養方法

原代肝細胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導產生的肝臟細胞或是cancer細胞系，原代肝細胞在造模的同時不需要復雜的對細胞進行重編程，以及誘導分化，可以更方便更快速的進行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比，原代肝細胞能夠更準確的反應體內的真實情況，有數據表明，原代肝細胞比iPSC誘導產生的肝細胞內的堿基取代少數倍，同時這些細胞還保留了捐獻者的特有特征，是較為理想的研究模型。另一個優勢在于，原代肝細胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型，因為原代細胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性，同時也具備其他兩種肝細胞在應對病原體時的生理反應。汕尾鮭魚原代肝細胞培養立沃生物的原代肝細胞可提供不同狀態的細胞，如貼壁細胞、懸浮細胞等，滿足客戶基于使用場景的個性化需求。

    在原代肝細胞培養過程中，如何檢測污染情況？在原代肝細胞培養過程中，檢測污染情況是非常重要的，可以通過以下幾種方法進行檢測：1.肉眼觀察：通過肉眼觀察培養物的外觀、顏色、透明度等是否異常，如果出現渾濁、變色、沉淀等異常情況，可能是污染所致。2.顯微鏡觀察：使用顯微鏡觀察培養物中的細胞形態、數量、分布等是否異常，如果出現細胞變形、破裂、死亡等異常情況，可能是污染所致。3.細菌培養：將培養物接種到細菌培養基中，觀察是否有細菌生長，如果有細菌生長，說明培養物受到了細菌污染。：使用PCR技術檢測培養物中的細菌、病毒等微生物的DNA，如果檢測到DNA存在，說明培養物受到了污染。總之，在原代肝細胞培養過程中，需要定期進行污染檢測，及時發現和處理污染，以保證培養物的質量和實驗結果的準確性。

原代肝細胞可以用于乙肝病毒的對照試驗。為探究不同類型肝細胞對乙型肝炎病毒（HBV）的影響，以及不同藥物和生物學處理對HBV的影響，可以選擇了人原代肝細胞（PHH）樹鼩原代肝細胞（PTH）、hNTCP穩定表達豬肝細胞（PPH-hNTCP）和hNTCP穩定表達liver cancer細胞系（Huh7D-hNTCP）作為研究對象。 采用HBV模型，將不同類型肝細胞融合HBV，并進行藥物處理和生物學處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等，生物學處理包括過表達、敲除siRNA和shRNA等。通過對處理后的細胞進行評價，可以了解不同藥物和生物學處理對HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細胞對HBV的影響，為研究HBV的機制提供重要的實驗數據。同時，本研究還可以為開發新型抗HBV藥物提供參考，為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。立沃生物的原代肝細胞可以配套提供多種細胞凍存設備支持，包括程序降溫儀，低溫液氮罐等。

解決人工肝臟合成難題，原代肝細胞是理想的肝細胞源。目前，常用的肝細胞源有人原代肝細胞、動物原代肝細胞、liver cancer細胞系HepG2、HepaRG、永生化細胞以及干細胞等。其中，人原代肝細胞是理想的肝細胞源，因為它們具有完整的肝功能和生理特性，能夠更好地模擬人體肝臟的生理狀態。但是，由于人原代肝細胞的獲取和保存非常困難，且存在批次差異和有限的增殖能力，因此在實際應用中受到了一定的限制。 相比之下，動物原代肝細胞則具有更好的增殖能力和更便捷的獲取方式，但是由于動物肝臟與人肝存在一定的差異，因此其在模擬人體肝臟生理狀態方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG則是常用的liver cancer細胞系，它們具有較好的增殖能力和穩定性，但是存在致瘤風險，因此在臨床應用中需要謹慎使用。 永生化細胞則是通過基因工程技術將原代肝細胞轉化為無限增殖的細胞系，如HepG2.2.15和Huh7等。這些細胞系具有較好的增殖能力和穩定性，但是存在一定的局限性和風險。 綜上所述，原代肝細胞是理想的肝細胞源，選擇合適的肝細胞源需要綜合考慮其功能、增殖能力、安全性等因素，以期達到想要的生物人工肝效果。原代肝細胞冷凍復蘇后若用于懸浮培養，由于失巢凋亡一般壽命是6小時左右，而貼壁肝細胞可以存活達15天。東莞羅非魚原代肝細胞培養步驟

立沃生物原代肝細胞配套提供多種細胞培養實驗合作服務，包括細胞培養實驗合作、細胞培養實驗項目合作等。廣東魚原代肝細胞培養方法

貼壁培養是一種常用的細胞培養方法，可以使原代肝細胞在培養皿表面附著生長，形成單層細胞群落。原代肝細胞的貼壁培養需要注意以下幾點： 1. 分離和準備細胞：從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細胞后，需要進行細胞計數和質量檢測，確保細胞數量和質量符合要求。 2. 培養基的選擇：原代肝細胞的培養基需要選擇適合其生長和代謝的培養基，常用的培養基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養皿的涂層：為了使原代肝細胞能夠附著生長，需要在培養皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細胞黏附因子。 4. 細胞接種和培養：將準備好的原代肝細胞接種到涂層好的培養皿中，加入適量的培養基，放入恒溫培養箱中進行培養。需要注意的是，原代肝細胞的培養時間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時更換培養基和進行細胞觀察。 原代肝細胞的貼壁培養可以通過在培養皿上加一定的的吸附涂層來達到讓原代肝細胞快速貼壁的效果。廣東魚原代肝細胞培養方法