貓作為原代肝細胞的常用供體,近年來在生物醫藥領域的研究中扮演著越來越重要的角色。相對于小鼠和大鼠等試驗用動物,貓的體型更大,便于試驗操作和觀察,因此被廣泛應用于科研、教育和藥物研發等領域。據美國農業部動植物衛生檢疫局(APHIS)的統計數據顯示,在2017年,美國就使用了約萬只貓進行試驗研究。而在中國,試驗用貓的年使用量也在不斷增加,據文獻報道,每年浙江省的藥品質量監測就需要使用400-500只試驗用貓。 貓的原代肝細胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過對貓的肝細胞進行體外研究,可以更加準確地評估藥物的代謝和毒性,為藥物研發提供重要的參考依據。此外,貓的原代肝細胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評估,為Clinical Treatment提供重要的支持。 然而,試驗用貓的使用也引起了一些爭議。一些動物保護組織認為,試驗用貓的使用會對動物造成痛苦和傷害,應該盡量減少或避免使用。因此,科研人員需要在確保研究質量的前提下,盡可能地減少試驗用貓的使用,采用替代方法和技術,以保障動物福利和人類健康。原代肝細胞可以用于研究肝臟的再生和修復,可以幫助人們更好地了解肝臟移植和liver cance。惠州豬原代肝細胞純化
原代肝細胞的分離方法有很多種,以下是其中幾種常見的方法:1.膠原酶消化法:膠原酶是一種使用廣的細胞分離酶,可以消化肝細胞外基質中的膠原蛋白,從而使肝細胞分離出來。該方法通常使用膠原酶消化肝臟組織,然后通過離心和過濾等步驟分離肝細胞。2.機械分離法:機械分離法是一種通過物理方法分離肝細胞的方法。該方法通常使用攪拌器、濾網或離心等設備將肝臟組織中的肝細胞分離出來。3.酶消化結合機械分離法:這種方法是將膠原酶消化和機械分離相結合的方法。該方法通常先使用膠原酶消化肝臟組織,然后通過機械分離的方法將肝細胞分離出來。4.密度梯度離心法:密度梯度離心法是一種通過離心的方法分離肝細胞的方法。該方法通常使用密度梯度介質(如Percoll或Ficoll)將肝細胞分離出來。以上是幾種常見的原代肝細胞分離方法,不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在選擇分離方法時,需要考慮肝臟組織的來源、肝細胞的數量和質量、實驗目的等因素。 江蘇草魚原代肝細胞培養方法立沃生物的原代肝細胞配套有有多種細胞培養技術支持,可以為客戶提供多維度的細胞培養技術支持解決方案。
原代肝細胞的2D培養模型是一種常用的實驗方法,用于研究肝細胞的生物學特性和功能。 原代肝細胞的2D培養模型具有許多優點。首先,該模型可以提供一定量的原代肝細胞,使研究人員能夠進行大規模的實驗研究。其次,該模型提供了一個穩定的環境,使研究人員能夠更好地控制原代細胞的生長和分化,以及研究肝細胞在不同條件下的反應和功能。此外,該模型還提供了一種簡單、快速和經濟的方法,用于評估藥物的毒性和療效,以及研究原代肝細胞在不同疾病狀態下的反應和功能。 原代肝細胞的2D培養模型也存在一些限制。首先,該模型只能提供有限的原代肝細胞數量,因為原代肝細胞在體外的壽命較短,容易失去其生物學特性和功能。其次,該模型無法完全模擬肝臟在體內的復雜環境,因此可能無法準確預測原代肝細胞在體內的反應和功能。此外,該模型也存在一些技術挑戰,如原代肝細胞分離和培養條件的優化等。 原代肝細胞的2D培養模型是一種重要的實驗方法,可以用于研究原代肝細胞的生物學特性和功能,以及評估藥物的毒性和療效。雖然存在一些限制,但該模型仍然是原代肝細胞研究的重要工具之一。
原代肝細胞也廣泛應用于嵌合體肝模型當中。通過將正常人原代肝細胞移植到患有嚴重聯合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉基因小鼠中,可以成功地構建嵌合體肝。而轉基因小鼠的uPA表達能夠促使鼠肝細胞死亡,從而為人原代肝細胞的移植、重建和增殖提供了一個適宜的微環境。在這種重建的嵌合體肝內,人肝細胞占據了大約75%的比例,并且能夠持續高水平地表達人血清蛋白。 通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠,研究人員發現在肝內可以檢測到病毒的RNA。然而,病理觀察并未發現病毒影響所導致的細胞病變。這一發現為研究病毒影響的機制提供了新的途徑,并為開發解決病毒影響的新方法提供了新的思路。 此外,這項研究還為研究肝細胞移植和重建提供了新的實驗模型。通過將人原代肝細胞移植到轉基因小鼠中,研究人員可以更好地研究原代肝細胞的生長、分化和功能,從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結果具有重要的臨床意義,有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。立沃生物科技有限公司原代肝細胞是從健康肝臟中提取后體外培養的,保留了肝臟的特性和功能。
貼壁培養是一種常用的細胞培養方法,可以使原代肝細胞在培養皿表面附著生長,形成單層細胞群落。原代肝細胞的貼壁培養需要注意以下幾點: 1. 分離和準備細胞:從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細胞后,需要進行細胞計數和質量檢測,確保細胞數量和質量符合要求。 2. 培養基的選擇:原代肝細胞的培養基需要選擇適合其生長和代謝的培養基,常用的培養基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養皿的涂層:為了使原代肝細胞能夠附著生長,需要在培養皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細胞黏附因子。 4. 細胞接種和培養:將準備好的原代肝細胞接種到涂層好的培養皿中,加入適量的培養基,放入恒溫培養箱中進行培養。需要注意的是,原代肝細胞的培養時間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時更換培養基和進行細胞觀察。 原代肝細胞的貼壁培養可以通過在培養皿上加一定的的吸附涂層來達到讓原代肝細胞快速貼壁的效果。立沃生物的原代肝細胞配套提供制度完備的細胞培養服務,為客戶提供個性化的解決方案。河北人體原代肝細胞培養技巧
用原代肝臟細胞進行Organoid搭建,還原體內肝臟的狀態,能極大地減少實驗的誤差和傳統藥篩的成本。惠州豬原代肝細胞純化
原代肝細胞的體外培養和研究有著很大的應用范圍。原代肝細胞(Primary hepatocytes)是指從動物肝臟取出后立即培養的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優點:1.與體內環境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留和維持了肝細胞的完整形態和肝細胞體外代謝活性,真實反應了體內的代謝情況。3.隨著技術水平的不斷提高,原代培養的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究;5.評價藥物和外源性物質對肝臟中細胞色素P450酶誘導作用并探討其誘導機制;6.預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;7.研究藥物的細胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細胞體外培養和研究的相關技術對于提升相關試驗的成功率非常有幫助。惠州豬原代肝細胞純化