原代肝細胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養板上，原代肝細胞可貼壁培養，同樣高密度培養有助于肝細胞分化狀態的維持。但原代肝細胞在體外的培養時間較短，人原代肝細胞在體外培養3天內可保持乙肝病毒易感性，培養兩周發生明顯的去分化以及細胞凋亡情況。北京大學鄧宏魁教授發表在《科學》上的數據顯示，通過添加5種小分子化合物抑制原代肝細胞去分化進程，可在體外長期維持肝細胞的分化狀態，維持時間長達八周。那為什么原代肝細胞在體外容易去分化呢？肝細胞在體外缺乏了肝細胞與肝非實質細胞的交流，又或者缺乏了肝臟的三維結構。基于以上問題與分析，我在碩士期間開展了肝細胞與肝非實質細胞的共培養工作。結果顯示，通過共培養，原代肝細胞可在體外長期培養，并在鋪板后的72天內仍然保持了乙肝病毒的易感性，說明缺乏細胞間交流是原代肝細胞發生去分化的原因之一。到目前為止，原代肝細胞體外維持四個月的時間記錄仍然沒有被打破。 原代肝細胞保留了肝細胞原始的生理功能與酶水平，是肝臟研究與藥物研發的“金標準”細胞模型。汕頭中國人原代肝細胞分離培養

貼壁原代肝細胞是一種非常重要的實驗材料，常用于酶誘導實驗。在進行實驗前，需要對細胞進行復蘇處理，使其恢復到正常狀態。復蘇后，需要使用鋪板培養基進行懸浮，調整細胞濃度，然后使用膠原包被板進行培養。一般情況下，細胞可以在4~6小時內貼壁。在原代肝細胞細胞貼壁后，需要更換維持培養基，繼續維持18小時，以保證細胞狀態能夠盡可能地恢復。一旦原代肝細胞細胞狀態恢復良好，就可以開始進行酶誘導實驗了。通過檢測代謝活性和mRNA誘導水平，可以了解原代肝細胞細胞的生理狀態和功能。整個周期來看，原代肝細胞細胞貼壁后可以維持6~7天的狀態。但是隨著時間的延長，細胞貼壁狀態會變差，細胞會出現脫落懸浮現象。因此，在進行實驗時，需要注意原代肝細胞細胞的狀態和質量，及時更換培養基，保持細胞的正常生長和功能。同時，也需要注意實驗條件的控制，避免對原代肝細胞細胞造成不良影響。通過科學合理的實驗設計和操作，可以獲得準確可靠的實驗結果，為研究原代肝細胞細胞生理和病理提供重要的實驗依據。東莞樹鼩原代肝細胞培養基利用原代肝臟細胞進行Organoid搭建，還原體內肝臟的狀態，能極大地減少實驗的誤差和傳統藥篩的成本。

原代肝細胞培養中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細胞培養是一種常用的實驗方法，但在培養過程中，細胞可能會受到endotoxin的污染，這會影響實驗結果的準確性。 endotoxin是一種由細菌產生的有毒物質，可以引起炎癥反應和細胞損傷。在原代肝細胞培養中，endotoxin可能來自于培養基、細胞培養器具或細胞本身。因此，需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑，例如聚陽離子樹脂（Polyclonal Cationic Resin，PCR）或聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）。這些去除劑可以吸附endotoxin，從而減少其對細胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單，只需要將其加入培養基中，然后將細胞培養在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養基中的endotoxin含量。如果檢測結果顯示endotoxin含量較高，可以考慮更換培養基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外，還可以采取一些預防措施來減少endotoxin的污染。例如，使用無菌技術操作、定期更換培養器具和培養基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細胞培養中必須注意的問題。采取適當的措施可以減少endotoxin的污染，保證實驗結果的準確性。

原代肝細胞在OOC中的應用備受關注。隨著生物技術的不斷發展，OOC技術已經成為了研究人體組織和疾病的重要手段之一。 原代肝細胞是從人體肝臟中分離出來的細胞，具有天然的生理功能和代謝特性。在OOC中，將原代肝細胞培養在微型芯片上，可以模擬人體肝臟的生理環境，從而更加真實地反映肝臟的生理和病理過程。 利用原代肝細胞構建的OOC可以用于研究肝臟疾病的發生機制、藥物代謝和毒性評價等方面。例如，研究人員可以將不同的藥物添加到OOC中，觀察原代肝細胞對藥物的代謝過程，從而預測藥物的療效和副作用。此外，還可以利用OOC評估化學物質對肝臟的毒性，為藥物研發和毒性評價提供更加準確的數據。 原代肝細胞在OOC中的應用為肝臟疾病研究和藥物研發提供了新的思路和方法，有望為人類健康事業做出更大的貢獻。立沃生物的原代肝細胞配套有多種細胞培養耗材，包括細胞培養濾器、細胞培養板皿瓶等。

   如何提高原代肝細胞的存活率？原代肝細胞是指直接從生物體肝臟中分離出來立即凍存的肝細胞，其存活率的提高可以通過以下方法實現：1.選擇合適的分離方法：選擇合適的分離方法可以提高原代肝細胞的存活率。例如，可以使用膠原酶消化法或機械分離法等方法分離肝細胞。2.控制培養條件：原代肝細胞的培養條件對其存活率有很大影響。例如，培養溫度、濕度、氧氣含量、培養基成分等都需要嚴格控制。3.使用合適的培養基：選擇合適的培養基可以提高原代肝細胞的存活率。例如，可以使用含有肝細胞生長因子、胰島素等成分的培養基。4.控制細胞密度：原代肝細胞的密度對其存活率也有很大影響。如果細胞密度過高，會導致細胞缺氧和營養不足，從而降低存活率。因此，需要控制細胞密度，使其保持在適當的范圍內。5.添加細胞保護劑：添加細胞保護劑可以提高原代肝細胞的存活率。例如，可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑，以減少細胞氧化損傷。6.定期更換培養基：定期更換培養基可以防止細胞代謝產物積累和營養不足，從而提高原代肝細胞的存活率。總之，提高原代肝細胞的存活率需要綜合考慮多種因素，包括分離方法、培養條件、培養基、細胞密度、細胞保護劑等。原代肝細胞作為體外藥物代謝研究的“金標準”，在藥物代謝和毒理學研究中具有重要的意義。佛山鮭魚原代肝細胞培養方法

原代肝細胞是一種重要的體外研究模型，可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。汕頭中國人原代肝細胞分離培養

原代肝細胞的3D培養是一種新興的細胞培養技術，它可以更好地模擬人體內肝臟的生理環境，從而更準確地研究肝臟疾病的發生機制。相比傳統的2D培養方式，3D培養可以提供更多的細胞-細胞和細胞-基質相互作用，使細胞在培養過程中更加穩定和健康。 在3D培養中，原代肝細胞被培養在一種類似于人體內肝臟的三維結構中，可以更好地模擬人體內肝臟的生理環境。此外，3D培養還可以提供更多的氧氣和營養物質，使原代肝細胞在培養過程中更加穩定和健康。 原代肝細胞的3D培養模型可以用于研究肝臟疾病的發生機制和治療方法，例如liver cancer、肝纖維化、肝硬化等。此外，它還可以用于藥物篩選和毒性測試，從而更好地評估藥物的安全性和有效性。 原代肝細胞的3D培養是一種具有廣闊應用前景的新興細胞培養技術，它可以更準確地模擬人體內肝臟的生理環境，為肝臟疾病的研究提供更加可靠的實驗模型。汕頭中國人原代肝細胞分離培養