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HLA-A2糖尿病細胞模型糖尿病研究策略

來源: 發布時間:2025-05-04

在胰島細胞刺激中,基礎和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數為11.6±1.8。通過應用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM),驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加,從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/106細胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細胞。Human cell design 構建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上(左圖),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現出10倍的胰島素分泌反應(右圖),對GLP-1R激動劑, Exendin4刺激產生明細那反饋, 且可實現批量化生成,實現穩定供應。
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在EndoC-βH5細胞中檢測到所有對β細胞身份和功能重要的轉錄因子的表達。與成人b細胞相比,EndoC-βH5細胞中的表達水平相似(FOXA2、MNX1、NKX2.2)或更高(HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1)。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細胞中以較低水平表達EndoC-βH5細胞中表達與胰島素分泌相關的受體,包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰haoxuetang素(GCGR)、生長抑素(SSTR2)和腸jiangxuetang素受體,例如胰gaoxuetang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是,EndoC-βH5細胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細胞中更豐富.

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這些小鼠在2至3個月內出現低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。HumanCellDesign(HCD)開發了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhongliu產生功能的人類β細胞系。在胰島素啟動子的控制下,用表達SV40LT的慢病毒載體轉導人類胎兒胰腺芽。HumanCellDesign開發了創新且安全的人類β細胞系生產方法。首先,將每個轉導的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發育的允許部位。在6到8個月內,所有移植的小鼠都發生了原發性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發性胰島素瘤中這些高度血管化的區域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達hTERT的慢病毒進行轉導,并移植到其他SCID小鼠中。更多關于HumanCellDesign的產品信息,歡迎咨詢AlibioBuy。EndoC-B h1表達了許多B細胞特異性標記,而沒有任何其他胰腺細胞類型標記的實質性表達。北京人胎兒胰腺組織糖尿病細胞模型

糖尿病細胞模型永生化人B細胞系需要在無菌條件下進行操作。HLA-A2糖尿病細胞模型糖尿病研究策略

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