DAPI是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料,常用熒光顯微鏡觀測,可以透過完整的細胞膜,可用于活細胞和固定細胞的染色,其工作濃度一般為0.3mmol/L或0.1ug/ml。顯微鏡下可以看到藍色熒光的細胞,熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高 ,且對活細胞無毒副作用。DAPI染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發波長為340nm,大發射波長為488nm, DAPI和雙鏈DNA結合后,大激發波長為360nm,大發射波長為460nm。科研實驗中試劑取用應注意事項：讀數時量筒必須放平穩。胰蛋白酶溶液(1%)

試劑空白吸光度是反映試劑質量的指標之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質;如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變為紅色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉肽酶、淀粉酶等檢測試劑會因基質分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶等負反應，在放置過程中其試劑空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上，吸光度上升的反應，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限;相反，吸光度下降的反應，其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此，試劑空白吸光度限值，常作為程序參數輸入儀器，如經核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。胰蛋白酶溶液(1%)利福平溶液怎么配制：過濾滅菌后，小份分裝（1-2ml每管）后，置于－20℃保存。

試劑盒實驗技巧：濃洗刷液或許會有結晶分出，檢測試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗刷時不影響效果。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數（n倍）后再測定，核算時請后乘以稀釋倍數（×5×n）。各步加樣均應運用加樣器，并經常校正其正確性，以避免實驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數目多，舉薦運用排加樣。封板膜只限一次性運用，以避免交叉污染。嚴格按照說明書的操作進行，檢測試劑盒實驗效果斷定有必要以酶標儀讀數為準。

PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱，不只偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用，蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用，對完整的、具有活性的物質不能保證其在適條件下參與生物反應，所以使用PBS是。PBS也不是的，有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持的條件保證生物活性物質保持其完整的特性。已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。

檢測試劑盒說明：檢測原理：選用雙抗體夾心ABC-法。試劑盒保存：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻頻運用時)。濃洗刷液低溫保存會有鹽分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。中、英文說明書或許會有不一致之處，請以英文說明書為準。剛敞開的酶聯板孔中或許會含有少量水樣物質，此為正常現象，不會對實驗效果形成任何影響。檢測試劑盒優勢：活絡、特異的抗體；安穩的重復性和可靠性；吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；適用血清、血漿、安排勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型。瓶上裝有滴管的試劑瓶稱作滴瓶。Nitsch培養基

挑選ELISA檢測試劑盒的方法：靈敏度。反應的是檢測試劑盒檢出被檢物質的低量的才行。胰蛋白酶溶液(1%)

穩定轉染細胞的篩選：1、轉染48 h后，用含適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。注意：細胞處于活躍分裂狀態時的殺傷效果較好。但細胞過于稠密，其效率會降低，較好將細胞稀釋至豐度低于25%。2、每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。3、篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間（取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果）。4、挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。5、后續更換正常培養基培養即可。胰蛋白酶溶液(1%)

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