PCR- RFLP 法是先擴增一基因或基因片段, 再用限制性內切酶酶切擴增片段, 然后電泳分酶 切片段。PCR- RFL P 分析細菌的 16S rRNA 基 因, 可鑒定到種和亞種的水平。16S rRNA 基因的 擴增產物如用一種限制性內切酶消化得到的圖譜 信息很少, 分辨率不高。因此, 對于某些菌種需要 兩種或三種不同的內切酶方能作后續的鑒定。如 將該技術與 ARDRA( Amplified rDNA Restriction Analysis) 技術結合, 依據原核生物 rDNA 的保守 性, 將擴增的 rDNA 進行酶切, 然后通過酶切圖譜 來分析菌間的多樣性, 該法無需將試樣分純, 簡 便、高效, 是一種很有發展前途的方法。上海融享生物科技有限公司主營測序很多，其中ITS 銷很好。重慶真核微生物16S測序機構電話

在細菌的系統分類學研究中有用的和常 用的分子鐘是 rRNA, 其種類少、含量大(約占細菌 RNA 含量的 80%), 分子大小適中, 存在于所有的 生物中, 特別是其進化具有良好的時鐘性質, 在結 構與功能上具有高度的保守性, 素有“細菌化石” 之稱。rRNA 是細菌和真核細胞核糖體的基本組 成部分, 編碼 rRNA 的基因是按 5′- 16S- 23S- 5S- 3′方式排列的, 由兩個非編碼的間隔區序列所分 開。16S rDNA、23S rDNA、5S rDNA 三部分組成 一個 RNA 操縱子, 這個操縱子作為一個單位進 行轉錄。轉錄后處理成為成熟的 16S、23S 和 5S rRNA。重慶真核微生物16S測序機構電話上海融享生物科技有限公司測序的16s 擁有完善的售后服務。

１６Ｓ～２３ＳｒＲＮＡ 基因間區不但可以用于菌種間的鑒別，還 可

以用來分辨１６ＳｒＲＮＡ 基因不能鑒別的非常接近的菌種和種

內 菌 株，是 １６ＳｒＲＮＡ 基因分析很好的補充。金 中 淦

等利用１６ＳｒＲＮＡ、１６Ｓ～２３ＳｒＲＮＡ 基因對主要血流

病原菌進行檢測比較后認為在細菌鑒定中，１６Ｓ～２３ＳｒＲＮＡ

可作為比１６ＳｒＲＮＡ 基因更好的分子靶標，可 以 在２４ｈ內 將

病原菌的種類報告給臨床醫生。Ｚｈｕ等的 研 究 表 明１６Ｓ～

２３ＳｒＲＮＡ 基因分析 可 以 將１６ＳｒＲＮＡ 序 列 同 源 性 達９７％的

兩株黏質沙雷菌區分開。根據１６Ｓ～２３ＳｒＲＮＡ 基因間區兩端

被高 度 保 守 的ｒＲＮＡ 所包圍的結構特點，可 利 用 其 兩 端 １６Ｓ

ｒＲＮＡ 及２３ＳｒＲＮＡ 保守區設計通用引物作上、下 游 引 物，特

異性擴增特定細菌 的１６Ｓ～２３ＳｒＲＮＡ 基 因 間 隔 區，根 據 片 段

數目、長度、序列的多態性或測序來鑒別微生物。

原核生物(細菌、古菌) rRNA 按核酸的沉降系

數分為 3 種，分別為 5S、16S 和 23S。16S rRNA 是

核糖體 RNA 的一個亞基，16S rRNA 基因就是編碼

該亞基的基因。其存在于所有細菌染色體基因組

中，參與生物蛋白質的合成過程，并在生物進化的

漫長歷程中保持一定的遺傳保守性，是細菌系統分

類研究中有用和常用的分子標記。16S rRNA

基因分子大小適中(長度約為 1540 bp)，在結構與功

能上又具有高度的保守性，檢測方便并且與原核生

物的系統發育關聯密切，因此逐漸成為常用的原

核生物標記基因。16S rRNA 編碼基因序列共有

9 個保守區和 9 個高可變區，其中 V4?V6 區

數據庫信息全、特異性好，是細菌多樣性分析的常

用目標區域。

上海融享生物科技有限公司測序的ITS 擁有完善的售后服務。

用下一代測序技術(next generation sequencing，NGS)測定

16S/18S/ITS 某個可變區的序列，可以反映環境樣

品在細菌、、古菌等組成的微生物群落之間的

差異，對研究海洋、土壤、宿主等不同環境中的

微生物群落組成及動態變化有重要的指導作用，同

時也是系統發育和分類學研究中一種使用的方法。

顯，能夠反映出種屬間甚至菌株間的差異。此外，

ITS 序列片段較小(ITS1 和 ITS2 長度分別為 350 bp

和 400 bp 左右，但不同物種之間存在一定差異)，

易于分析。也就是說，ITS 具有更高的擴增和測序

成功率以及分類學分辨率，目前已被應用于真

菌不同種屬的系統發育分析。 您喜歡16s 的這些特點嗎？重慶真核微生物16S測序機構電話

18S 的各種測序應用領域還是不一樣的。重慶真核微生物16S測序機構電話

2000 年, M Manzano 等利用溫度梯度凝膠電泳的方法 分析 16S rRNA 對分離自食物中的利斯特氏菌進行了鑒定。 2001 年, HJ Monstein 等利用溫度梯度凝膠 電泳和 PCR 擴增 16S rRNA 的 V6 區 ( 可變區) 片段的方法對 16 株腸球菌進行了鑒定。2001 年, 沈永才等利用 16S rRNA 的 PCR 法鑒定了 8 株 雙歧桿菌, 并用 16S rRNA 熒光定量 PCR 法對雙 歧桿菌進行了定量檢測。2002 年, A Manero 等對 利用 16S rRNA 探針雜交的方法鑒定腸球菌屬細 菌進行綜述。2002 年, Y Woo- PatrickC 等通過 16S rRNA 序列分析的方法, 從一位菌血癥膽囊 炎患者體內檢測到了唾液乳桿菌的存在。2003 年, Y Seto 等對 16S rRNA 序列特定長度片段進 行 分 析 , 對 人 體 糞 便 樣 品 中 嗜 酸 乳 桿 菌 ( Lactobacillus acidophilus) 的分布情況進行了檢 測。2003 年, JR Byun 等利用分析 16S rRNA 和 23S rRNA 間區序列的方法對一株鼠李糖乳桿菌 ( Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103) 進行了鑒 定, 并與干酪乳桿菌( L. casei) 、嗜酸乳桿菌( L. acidophilus) 和瑞氏乳桿菌( L. helveticus) 的 16S rRNA 和 23S rRNA 間區片段進行了比較。重慶真核微生物16S測序機構電話