在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞（原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞）轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑（左圖）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右圖）分別將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后，用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。

對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所（Roswell Cancer Institute）的 Lyn Gao 博士友情提供

研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。廣東12孔板轉(zhuǎn)染試劑用量

轉(zhuǎn)染 48 小時后，使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6.  帶有 6xHis 標(biāo)記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色（右上圖 E），道 1 為 LipoD293293、道 2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量（見右下圖 F）。產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細(xì)胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 廣東pei液體轉(zhuǎn)染試劑用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中**常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢***、腺***和腺相關(guān)***等**常見，其侵染效率可以達到90%以上，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***，無論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢一分貨，性能好的價格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法，主要包括兩類：陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過正負(fù)電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。

高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。

細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。

兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡介：

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實驗。

優(yōu)勢：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。

2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。

3.對于常用細(xì)胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成； 混勻后室溫下孵育15-20分鐘，直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.北京dmrie-c轉(zhuǎn)染試劑

mRNA細(xì)胞&***轉(zhuǎn)染試劑來助力.廣東12孔板轉(zhuǎn)染試劑用量

簡介：

X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。

優(yōu)勢：

1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。

2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。

3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好.

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENE HP，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)). 廣東12孔板轉(zhuǎn)染試劑用量