在難轉(zhuǎn)染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。
對難轉(zhuǎn)染細胞 LNCap 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較
在難轉(zhuǎn)染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)
帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,混合了不同 配方的脂類(非脂質(zhì)體)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應用案例,可轉(zhuǎn)染各種細胞,靠譜!
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,混合了不同配方的脂類(非脂質(zhì)體)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。
用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。
3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 pei轉(zhuǎn)染試劑說明書主要內(nèi)容是什么?上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑購買
每孔培養(yǎng)體積均為100μL,細胞數(shù)目在105左右。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理
在政策促進下,未來3—5年內(nèi),我國將在醫(yī)藥健康短缺地區(qū)建設一批高水平臨床醫(yī)治中心、高層次的人才 培養(yǎng)基地和高水平的科研創(chuàng)新與轉(zhuǎn)化平臺,培育一批品牌優(yōu)勢明顯、跨區(qū)域提供高水平服務的集團。根據(jù)細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體相關(guān)領域極新技術(shù)發(fā)展趨勢,《2019年本》在鼓勵類條目中新增了新型技術(shù)開發(fā)和應用的有關(guān)內(nèi)容。例如,在化學原料藥領域增加了“連續(xù)反應”等技術(shù),在技術(shù)領域增加了“基因醫(yī)治”和“抗體偶聯(lián)”等技術(shù),在藥用包裝材料領域增加了“中性硼硅藥用玻璃”等新型材料與技術(shù)的開發(fā)應用,在醫(yī)藥領域增加了“人工智能輔助醫(yī)藥設備”等新技術(shù)內(nèi)容。自2015年以來,健康科技成為醫(yī)藥健康有限責任公司增長**快的領域。事實上,根據(jù)硅谷銀行的分析,有風投支持的健康科技行業(yè)募資次數(shù)在這段時間增長了25%,硅谷銀行與其中大約40%的歐美公司進行了合作。加之從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡技術(shù)領域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務,軟件開發(fā),電子商務(不得從事增值電信、金融業(yè)務),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用物品、易制毒化學品)、實驗窒設備的銷售。“兩票制”壓縮流通渠道層級,減少中間環(huán)節(jié)層層加價;反商業(yè)賄賂、稅務改進等一系列政策的落地,迫使產(chǎn)業(yè)從不規(guī)范、低水平的商業(yè)化向規(guī)范的、高水平成熟的商業(yè)化進化。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理