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來源: 發布時間:2023-04-11

細胞轉染如果以上都沒有問題,那么******重要的環節就是慢***質粒轉染293T細胞了,轉染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉染試劑在此時就是至關重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強大,值得信賴且經濟高效的瞬時轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統中,能在96孔板至100L生物反應器范圍內提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉染試劑,以獲得他們所需要的優勢。相較于其他類型轉染試劑,使用自行制備的PEI轉染試劑可以使總轉染成本降低高達40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數據表明,去乙酰化的PEI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質粒DNA轉染效率提高21倍,小鼠體內靶向效率達到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉染試劑.polviet轉染試劑分裝

LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。懸浮細胞轉染試劑配制連續細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。

基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內吞作用進入細胞質。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,因此實驗條件摸索和優化時間較長,且重復性不佳。基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。

LipofectamineRNAiMAX轉染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉染試劑能夠在***的細胞系中(包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉染的細胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優良的轉染效果相對于其他的siRNA轉染試劑,LipofectamineRNAiMAX轉染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下,LipofectamineRNAiMAX轉染試劑實現了更高的有效***細胞/未轉染細胞比率,超過其他RNAi試劑。轉染產品知多少:轉染試劑選擇工具.

產生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉染進293T細胞。一個GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后,細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數字表明轉導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產生的慢***的滴度被量化,分為是8x10^6和3x10^6tu/ml。將20μL轉染復合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養皿,混合均勻;上海懸浮細胞轉染試劑類型

用了這個轉染試劑,慢***再也不用怕轉不進去了!polviet轉染試劑分裝

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