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LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。動物轉染試劑推薦轉染后6h觀察細胞狀態，并更換培養基，繼續培養24 h后收取細胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。

X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優勢：1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋，再與質粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作.

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簡介：X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑，兼容含血清或不含血清的培養基，可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩定。2.高轉染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑，結果相關性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP，導致存活細胞量減少(圖片來源于網絡).在經過***次傳代培養之后，原代培養物變成了一種細胞系。上海陽離子聚合物轉染試劑對照

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對CHO細胞轉染效率的比較右圖：使用以上轉染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產商的提供的轉染步驟分別轉染到CHO細胞。在轉染24小時后，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學發光監測器測定；GFP陽性細胞率使用BD公司的FACS檢測。左圖：LipoD293試劑（升級版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的價格比較（美元/1000微升）。所有的價格是從生產制造商的網站上收集對CHO細胞轉染效率的比較右圖：使用以上轉染試劑將編碼熒動物轉染試劑推薦

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