簡介：X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑，兼容含血清或不含血清的培養基，可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩定。2.高轉染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑，結果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP，導致存活細胞量減少(圖片來源于網絡)...細胞培養系列 | 專為 293T 優化的轉染試劑 Nano293T.完全培養基和轉染試劑的公司

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此，它們的形態學和生理特征和體內狀態更為相似。但相對于連續細胞系，它們通常更難培養和轉染。在經過***次傳代培養之后，原代培養物變成了一種細胞系。源自于原代培養物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位，從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩定轉染的克隆傳代。怎么配制轉染試劑原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.

胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要??！當然也要保證細胞狀態特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態好的細胞才可以產生較高滴度的***哦！載體系統在實驗中**常見的慢***載體系統有三質粒系統、四質粒系統，當然使用三質粒系統的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業化的載體系統！載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構建純化良好，質粒間比例得當，并且對質粒進行酶切驗證。

基于磷酸鈣成分的轉染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物，粘附到細胞膜表面，借助內吞作用進入細胞質。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響，因此實驗條件摸索和優化時間較長，且重復性不佳。基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑，DNA并沒有預先包埋在脂質體中，而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上，形成DNA-陽離子脂質體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單，重復性好，在體外轉染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。**于siRNA的轉染試劑，還有通用型轉染試劑Lipofectamine?.

細胞轉染是指將外源基因如DNA，RNA等導入細胞內的技術。隨著分子生物學的發展，轉染已經成為研究和控制細胞基因功能、實現基因調控的常規工具。市場上各種轉染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒有任何一種轉染試劑可以能夠適用于所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的，成分控認為轉染試劑的成分及作用機理對轉染效果及細胞生理作用影響***，是轉染試劑選擇的重要依據，選試劑時要留意成分哦。嚴格來講，轉染的方法可以基于化學法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及***介導法，沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類轉染試劑的化學法轉染。轉染后6h觀察細胞狀態，并更換培養基，繼續培養24 h后收取細胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。北京適合a549的轉染試劑

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LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點：高轉染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高，適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質粒轉染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作，通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。完全培養基和轉染試劑的公司

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