外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽...
細胞外基質生理學功能:對基因表達的影響:細胞外基質中不同的機械特性對細胞行為和基因表達都有影響。盡管實現這一點的機制尚未完全解釋清楚,但粘附復合物和肌動蛋白-肌球蛋白細胞骨架(其收縮力通過跨細胞結構傳遞)被認為在尚未發現的分子途徑中起著關鍵作用。對分化的影響:...
外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據相關報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調節基質細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成;而LCC-e...
專利申請利用分離培養人尿液來源細胞并收集培養基來進行體外培養,直接把外泌體從尿液中沉降下來,無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法,是首先分離培養人尿液來源細胞并收集培養基,將人尿液來源細胞的培養基通過0.22微米濾膜過濾,以...
細胞外基質成分居然能調節葡萄糖代謝過程:細胞具有不同的機制以感知和響應外在代謝信號。例如,細胞通過mTORC1感知營養素可用性并相應地在分解代謝和合成代謝狀態之間轉換來協調全身和細胞代謝;生長因子,和細胞因子可以將代謝信號傳遞給相鄰細胞和遠端組織,作為更普遍的...
外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容,短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、...
外泌體與免疫系統:不同的細胞來源的外泌體,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓...
細胞外基質成分居然能調節葡萄糖代謝過程:確認ECM組分透明質酸與新陳代謝之間的機制聯系,用透明質酸酶處理細胞和異種移植物引發糖酵解的強烈增加。這主要通過快速受體酪氨酸激酶介導的mRNA衰變因子ZFP36的誘導來實現,其靶向TXNIP轉錄物以降解。因為TXNIP...
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取...
細胞外基質和膠原的結構:細胞外基質(extrcellulrmtrix,ECM)分為可溶性基質和不溶性基質。不溶性基質由糖蛋白(glycoprotein)和蛋白多糖(proteoglycn,PG)交聯在一起構成細胞外基質的骨架結構。可溶性基質由膠原蛋白組成,附著...
細胞外基質重建你的身體:但部位并不是較少我們想要再生的目標,巴迪拉克立即意識到,基質的錨定作用可以幫助他解決不同的問題——肌肉生長。損壞的肌肉能夠在一定程度上再生,但如果某一特定肌肉群受到嚴重傷害,傷疤組織將阻礙肌肉的重生。從身體其他部位移植肌肉是目前較少的辦...
外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養基對人脂肪來源間充質干細胞進行饑餓培養,這樣可使干細胞處于正常生長狀態,不會被克制生長增殖,其所分泌的外泌體所包含的有效物質也更貼近其自然狀態下的外泌體,然后將含有外泌體的培養上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再...
蛋白聚糖在細胞外基質中的功能是什么:蛋白聚糖或透明質酸-蛋白聚糖復合物構成了細胞外基質的基質,由于它們是高度酸性的,且帶負電荷,因此能夠結合大量的陽離子,這些陽離子又可結合大量的水分子,這樣,蛋白聚糖形成了多孔的、吸水的膠狀物,如同包裝材料,填充在細胞外基質中...
蛋白聚糖在細胞外基質中的功能是什么:蛋白聚糖的這種性質,使細胞表面具有較大的可塑性,從而具有抗擠壓能力,對細胞起保護作用。由于透明質酸以可溶的形式游離存在,所以在細胞外體液和滑液(synovialfluid)中透明質酸的濃度很高,其結果提高了體液和滑液的粘度和...
細胞外基質的主要類型及功能:對人類細胞的研究表明,細胞外基質中的纖粘蛋白主要由成纖維細胞、上皮細胞等分泌并附著在細胞表面,其作用是促進細胞對基質的貼附,細胞之間的粘著,細胞內微絲及應力纖維的構建。觀察到轉化的體外培養的成纖維細胞,表面纖維蛋白量減少,與此相關地...
細胞外基質的組成可分為三大類:①糖胺聚糖(glycosaminoglycans)、蛋白聚糖(proteoglycan),它們能夠形成水性的膠狀物,在這種膠狀物中包埋有許多其它的基質成分;②結構蛋白,如膠原和彈性蛋白,它們賦予細胞外基質一定的強度和韌性;③粘著蛋...
細胞外基質和系統之間的這種相互作用在再生物種中是如何工作的尚不清楚。刺胞動物系統的主要調節因子是蛋白酶、絲氨酸蛋白酶克制劑、克菌蛋白和補體系統。的原始機制是克菌肽(AMPs),在水螅體再生過程中,一些被歸類為AMPs的基因被上調。細胞外基質不光靜態的發揮支持、...
將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Milli...
蛋白聚糖糖胺聚糖(GAGs)是碳水化合物聚合物,主要附著在細胞外基質蛋白上形成蛋白聚糖(透明質酸是一個明顯的例外,見下文)。蛋白聚糖具有吸引帶正電荷的鈉離子(Na+)的凈負電荷,鈉離子通過滲透作用吸引水分子,保持細胞外基質和固有細胞水分充足。蛋白聚糖也有助于在...
細胞外基質的作用:(一)細胞外基質的作用:細胞外基質不只具有連接、支持、保水、抗壓及保護等物理學作用,而且對細胞的基本生命活動發揮很全的生物學作用。1.影響細胞的存活、生長與死亡正常真核細胞,除成熟血細胞外,大多須粘附于特定的細胞外基質上才能克制凋亡而存活,稱...
來源于不同的組織的外泌體不僅具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關鍵分子。有關外泌體分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制近些年剛剛開始受到關注,與外泌體相關的被pubmed收錄的文章數量和國自然基金項目中標數量逐年增長,表明國內外對外...
近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應用已經涉及一些病癥治病領域、醫學基礎和免疫領域、寄生蟲領域;臨床研究上已涉及心血管系統、內分泌代謝系統等。外泌體來源及內含物。幾乎所有類型的細胞都可以分泌外泌體,同時外泌體也普遍存在于體液中,包括血液、眼淚、尿液、唾液、...
功能:細胞外基質的形成對生長、傷口愈合和纖維化等過程至關重要。對細胞外基質結構和組成的理解也有助于理解生物學中侵襲和轉移的復雜動力學,因為轉移通常涉及如絲氨酸蛋白酶、蘇氨酸蛋白酶和基質金屬蛋白酶對細胞外基質的破壞。細胞外基質的剛性和彈性對細胞遷移、基因表達和分...
如何理解細胞外基質影響細胞的粘附過程:1.決定細胞的形狀體外實驗證明,各種細胞脫離了細胞外基質呈單個游離狀態時多呈球形.同一種細胞在不同的細胞外基質上粘附時可表現出完全不同的形狀.上皮細胞粘附于基膜上才能顯現出其極性.細胞外基質決定細胞的形狀這一作用是通過其受...
大量關于一些病癥相關巨噬細胞的研究表明,一些病癥相關巨噬細胞通過與一些病癥細胞進行細胞間通訊,與一些病癥進展和轉移相關,然而對TAM與一些病癥細胞之間通信的研究限制于可溶性因子,例如促炎細胞因子,其中包括趨化因子、炎癥因子和生長因子等。較近的研究證據表明,外泌...
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質干細胞等。外泌體在免疫...
外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,可通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成多泡內涵體,內涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA、蛋白質、microRNA等多種物質,存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體...
外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心)。超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行(如圖所示),可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩定(可能與轉子類型有關),純度也受到...
細胞外基質的作用:1.決定細胞的形狀:體外實驗證明,各種細胞脫離了細胞外基質呈單個游離狀態時多呈球形。同一種細胞在不同的細胞外基質上粘附時可表現出完全不同的形狀。上皮細胞粘附于基膜上才能顯現出其極性。細胞外基質決定細胞的形狀這一作用是通過其受體影響細胞骨架的組...
專利申請利用分離培養人尿液來源細胞并收集培養基來進行體外培養,直接把外泌體從尿液中沉降下來,無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法,是首先分離培養人尿液來源細胞并收集培養基,將人尿液來源細胞的培養基通過0.22微米濾膜過濾,以...