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細胞凍存經驗談:選對凍存培養基才是王道：研究人員經常需要冷凍細胞并保存，以供后續實驗或臨床使用。基本過程相當簡單：慢慢冷凍細胞，將凍存管放入液氮中，并在需要時快速解凍。凍存培養基能支持細胞并防止冰晶形成。不過，Malfavon的體驗告訴我們，使用不同的凍存培養...

無血清凍存液通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養成分，提高細胞存...

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、凍存細胞是為了留種，所以要選擇高濃度的細胞量進行凍存。正常情況下，當細胞濃度達到1*105/ml時即可凍存，具體是多少量主要根據個人觀察。2、二甲基亞砜（DMSO)因為穿透細胞的能力較強，因此作為常用的凍存劑，也可以叫做細胞...

細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養液，而在我的試驗中的經驗總結為培養基越少細胞越容易貼附。2、復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養瓶中，分裝過多，細胞濃...

這種轉化細胞接種入正常機體，常能長成塊，并侵潤正常組織，發生普遍轉移。又如上皮細胞分泌膠原蛋白和膜粘蛋白于上皮組織的基底層上，反之，這些蛋白又作為信號“指揮”上皮細胞生長、遷移的方向。在胚胎發育或愈傷再生時，上皮細胞正是沿著基底層發展的。由此可知，調節細胞生長...

外泌體的提取分離：1、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單，獲得的囊泡數量較多而廣受歡迎，但過程比較費時，且回收率不穩定（可能與轉子類型有關），純度也受到...

外泌體相關蛋白質與肺病的診斷：近年來，高通量質譜分析被普遍地應用于篩選NSCLC外泌體蛋白的研究，這為我們揭示了更多具有生物標志物價值的分子。Birgitte等采用微陣列芯片技術研究了431例肺病患者和150例對照者血漿外泌體中的蛋白表達情況，發現CD151、...

細胞外基質的成分：構成細胞外基質的大分子種類繁多，可大致歸納為四大類：膠原、非膠原糖蛋白、氨基聚糖與蛋白聚糖、以及彈性蛋白。上皮組織、肌組織及腦與脊髓中的ECM含量較少，而結締組織中ECM含量較高。細胞外基質的組分及組裝形式由所產生的細胞決定，并與組織的特殊功...

所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研...

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Milli...

外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯系緊密，研究思路可以分為三大類：表達譜、分子標志物和分子機制方向，其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數據為主要內容，短平快發表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證，建立ROC、...

細胞外基質的作用：（一）細胞外基質的作用：細胞外基質不只具有連接、支持、保水、抗壓及保護等物理學作用，而且對細胞的基本生命活動發揮很全的生物學作用。1．影響細胞的存活、生長與死亡正常真核細胞，除成熟血細胞外，大多須粘附于特定的細胞外基質上才能克制凋亡而存活，稱...

將濃縮液加至20mmol/LTris/30%蔗糖/45%蔗糖(pH7.4)的密度梯度液上行4℃超速離心100000×g(水平轉子SW-41)8h,吸取位于蔗糖之上的顏色明顯較深條帶的液體約5mL,以10倍PBS稀釋混勻后再次用100-ku超濾離心管(Milli...

細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養液，而在我的試驗中的經驗總結為培養基越少細胞越容易貼附。2、復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養瓶中，分裝過多，細胞濃...

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了...

無血清快速細胞凍存液，是一種新型的快速凍存細胞的保護液，可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內含天然抗凍蛋白（Naturalantifrereprotein），不含動物來源的血清成分，能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力，減少各類病毒、霉菌和支原體等...

自制染色干燥細胞外基質膠：目的研究自制染色干燥細胞外基質膠羊膜(extracellularmatrixamnioticmembrane,ECM-AM)的生物活性因子表達情況、生物力學特征以及在兔結膜修補術中的應用效果。方法使用光鏡和HE染色對自制染色干燥ECM...

由于外泌體的特殊結構和功能，使得它具有潛在的應用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標，另一方面也可以作為治病手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。外泌體的分離純化一直是科研工作者關注的問題，獲得高純度的外泌體對后續的研究至關重要。據了解，目前人...

細胞外基質的成分：膠原（collagen）膠原是動物體內含量較豐富的蛋白質，約占人體蛋白質總量的30％以上。它遍布于體內各種部位和組織，是細胞外基質中的框架結構，可由成纖維細胞、軟骨細胞、成骨細胞及某些上皮細胞合成并分泌到細胞外。成纖維細胞周圍的膠原纖維目前已...

根據膠原的結構和功能可將其分為：纖維性膠原（fibrilformingcollagen）這是較經典的膠原，如Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ和Ⅺ型膠原。其肽鏈長達1000個氨基酸，是結締組織中含量較豐富的膠原。前膠原三螺旋的端肽被切除后縱向平行排列，其中每個膠原分子縱向稍偏移，相鄰...

無血清快速細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色：1.高安全性，...

無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細胞或貼壁細胞，離心去除上清培養液。2、加入適量的細胞凍存液，重懸細胞，調節密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件：2-8C保存，年有...

外泌體提取：1、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據外泌體的大小，從蛋白質和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體，也有設計成微柱多孔硅纖毛結構以分離40...

外泌體在肺病進程中的作用：在一些病癥微環境中，一些病癥細胞來源的外泌體能夠誘導CD4+T分化為調節性T細胞，壓制機體的抗一些病癥免疫反應；肺病細胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a，可在免疫細胞中結合并啟動TLR8，使TLR介導的NF-κB信號通路活...

細胞外基質（ECM）和骨骼肌：當肌肉組織受傷時，肌肉自然震顫功能受阻，淋巴管和血管無法把細胞外基質中玻尿酸產生的酸性物質帶走，引發代謝受阻的同時，細胞外基質內的PH值也會隨著酸堿失衡的環境逐漸變低，直接影響細胞產生ATP。隨著代謝受阻及細胞外基質內環境的變化，...

外泌體的提取、分離方法：開發高效、快速、穩定，并且保持外泌體結構和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應用于臨床的基礎和前提。從細胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產量卻和分離方法息息相關。通常分離步驟少、產率高，但是純度會受到影響。鑒于...

外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導致大量新生血管的生成，促進了一些病癥的生長與侵襲。功能：當外泌...

具膜囊泡，當我們使用常規方法分離這些結構時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體（exosome）適用于通過特殊手段拿到的由胞內體來源的釋放到細胞外的膜泡結構。建議對細胞外囊泡進行細分時使用物理上的界定如小細胞外囊泡（sEV）和中/大細胞外囊泡（m/lEV），...

血清血液成分（加入抗凝劑）血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血...

細胞外基質的主要類型及功能:對人類細胞的研究表明，細胞外基質中的纖粘蛋白主要由成纖維細胞、上皮細胞等分泌并附著在細胞表面，其作用是促進細胞對基質的貼附，細胞之間的粘著，細胞內微絲及應力纖維的構建。觀察到轉化的體外培養的成纖維細胞，表面纖維蛋白量減少，與此相關地...