用 LipoD293? 體外 DNA 轉染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉染 pEGFP-C1 質粒到 HEK293 細胞中。轉染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。
對懸浮 HEK293F 產生蛋白質效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉染試劑按照生產商的標準轉染步驟將 pEGFP-6xHis 質粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉染試劑均使用 30 微克質粒 DNA。 轉染試劑--總有一款你想要的.上海陽離子聚合物轉染試劑盒
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。
3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。
4.兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現均表現優異。 上海陽離子聚合物轉染試劑梯度并更換培養基,繼續培養24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。
細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。
兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現均表現優異。
用LipoFectMax?轉染Hela細胞,左圖轉染GFP cDNA,右圖共轉染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。
4適用于神經細胞的轉染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白(GFP),轉染24小時后觀察轉染效果,LipoFectMax? 轉染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。
LipoFectMax? 轉染試劑轉染試劑操作流程
細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。 國產轉染試劑制作原理是什么?
在選擇轉染方法時,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質)以及您希望轉染的細胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質體轉染試劑和Neon轉染系統。
我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對自己的結果更加自信.***的輸送效果—可轉染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結果,是因為核酸存在,而不是因為試劑需要的優化工作更少—針對大多數細胞類型提供了快速、簡便的實驗方案
連續細胞系 具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養過程中的表現可能無法必然地反映體內狀態。
.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。上海陽離子聚合物轉染試劑盒
轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續細胞系和原代細胞。上海陽離子聚合物轉染試劑盒
LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。上海陽離子聚合物轉染試劑盒