轉(zhuǎn)染 48 小時后，使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6. 帶有 6xHis 標(biāo)記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色（右上圖 E），道 1 為 LipoD293293、道 2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量（見右下圖 F）。產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑梯度
siRNA，加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min，將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻，培養(yǎng)細胞直到適當(dāng)?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”，方便至極。當(dāng)然，習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的，只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾，HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型：HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細胞類型，包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞，產(chǎn)品手冊中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細胞、角質(zhì)細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟，貼心上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑梯度3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。
簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP，導(dǎo)致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))...
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.
胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！！當(dāng)然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！
載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證. 轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細胞系和原代細胞。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑盒
無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率。上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑梯度
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性，在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證，尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑梯度