無血清細胞凍存液產品介紹:無血清細胞凍存液是一款針對細胞凍存和復蘇所研發的即用型細胞凍存液。該凍存液采用獨特的凍存配方,包括DMSO在內的凍存保護劑復合物,**降低了細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細胞營養成分,***提高了細胞的活力和復蘇率。無血清細胞凍存液不含牛血清,無任何動物源組分,可維持干細胞低分化狀態,并且可減少各類***和支原體污染的風險,確保細胞凍存安全。與傳統細胞凍存液相比,本產品重懸細胞后可直接凍存于-80℃,無需程序降溫。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。上海免疫細胞凍存液配比細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO...
預期用途:成分確定、無需程序降溫,所有原料均為注射級,內***水平低于0.06EU/mL。本產品為埃澤思(AppliedCell)推出一款即用型的無血清細胞凍存液,本款產品在常規凍存液基礎上做了大量優化,主要具有幾大特點:凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細胞凍存液,且細胞復蘇率高,尤其對干細胞干性維持以及細胞表面蛋白保護有極好效果。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓等間充質干細胞,免疫細胞以及大多數細胞系凍存。同時該款所有成分均使用藥用級原料配制而成,內***水平<0.06EU/mL,適用不同應用場景。細胞凍存液的原理是什么?上海原代細胞凍存液如何存儲凍存...
注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0.22micronFGLPTelflon過濾或是直接購買無菌產品,如SigmaD-2650),以5~10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。細胞凍存液在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。無血清細胞凍存液廠家預期用途...
細胞凍存是細胞培養、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是必不可少的實驗操作。因為在沒有建立一個穩定的細胞系或穩定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導致實驗失敗,如果沒有原始細胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄“細胞凍存液的細胞存活率和活力高,批次性差異小.江蘇hela細胞凍存液配比3、取待凍存的細胞用胰蛋白酶消化(方法見細胞的傳代部分)。用含血清的培養基將細胞沖洗下來,將細胞懸液吸到無菌離心...
在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內即恢復到常溫,細胞內外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產生,凍存的細胞經復蘇后仍保持其正常的結構和功能。冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復溫速率有關。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣諾為生物所提供的STEMCELLTechnologiescGMP級別、無血清的細胞凍存液可使長期儲存的細胞保持高存活率,可應用于臨床細胞和特殊珍貴細胞的凍存。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。江蘇低溫細胞凍存液生產廠家運輸細胞類型:包括多...
凍存風險在凍存中,會對生物材料造成損傷的階段往往出現在材料結冰的過程中,那么伴隨著這樣一個結冰的過程,往往會產生以下的風險。1.溶液的影響當冰晶在凍結的水中形成的時候,溶液中的溶質便會析出,液體中會形成很高的溶解物濃度,從而會導致生物材料所處的環境的滲透壓升高,對生物材料造成不可逆的損傷。2.細胞外的冰晶形成當生物材料的凍存時間過長時,生物液(水)會從生物材料中遷移出來,并在細胞外形成冰晶,而這樣的冰晶對脆弱的細胞膜來說無疑是“致命威脅”。細胞凍存液的原理是什么?江蘇新型細胞凍存液一般加多少細胞復蘇1.從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。2.從37℃水浴中取出...
用以下方法凍存細胞:4℃放置15-30分鐘(一定不能省略該步驟,否則凍存液無法完全滲透過細胞膜進入細胞起保護作用)①緩速降溫方法(以使用需異丙醇的Nalgene程序降溫盒為例,冷凍細胞的過程中可以輔助實現緩慢降溫,以達到近似于1℃/分鐘):-80℃過夜→液氮長期保存。(不推薦在-80℃長期保存;異丙醇易揮發,并且容易吸收空氣中的水分,建議使用5次后更換)②逐步降溫法:-20℃保存2小時,然后-80℃中保存2小時,隨后可以在-196℃液氮中長期保存。凍存盒凍存細胞原理是什么?江蘇免疫細胞凍存液性能指標細胞復蘇佩戴眼鏡和手套,從液氮中取出凍存的細胞管。迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使...
無血清細胞凍存液產品介紹:無血清細胞凍存液是一款針對細胞凍存和復蘇所研發的即用型細胞凍存液。該凍存液采用獨特的凍存配方,包括DMSO在內的凍存保護劑復合物,**降低了細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細胞營養成分,***提高了細胞的活力和復蘇率。無血清細胞凍存液不含牛血清,無任何動物源組分,可維持干細胞低分化狀態,并且可減少各類***和支原體污染的風險,確保細胞凍存安全。與傳統細胞凍存液相比,本產品重懸細胞后可直接凍存于-80℃,無需程序降溫。細胞凍存液配制比例是?江蘇足細胞凍存液無血清細胞凍存液介紹1.是一種通用型的細胞凍存液,可用于凍存人和各種動物細胞株...
凍存風險 在凍存中,會對生物材料造成損傷的階段往往出現在材料結冰的過程中,那么伴隨著這樣一個結冰的過程,往往會產生以下的風險。 1. 溶液的影響 當冰晶在凍結的水中形成的時候,溶液中的溶質便會析出,液體中會形成很高的溶解物濃度,從而會導致生物材料所處的環境的滲透壓升高,對生物材料造成不可逆的損傷。 2. 細胞外的冰晶形成 當生物材料的凍存時間過長時,生物液(水)會從生物材料中遷移出來,并在細胞外形成冰晶,而這樣的冰晶對脆弱的細胞膜來說無疑是“致命威脅”。 細胞凍存液比例是多少?南京凍存細胞凍存液 長期上海儒安生物科技有限公司抗體去除液產品簡介:蛋白印跡膜再生液,用于...
如果將細胞暴露在這樣高溶質的溶液中且時間過長,細胞膜上脂質分子會受到損壞,細胞便發生滲漏,在復溫時,大量水分會因此進入細胞內,造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質損傷或稱溶液損傷。當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,產生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在很低溫條件下保存細胞凍存液一般有兩種配置方法是什么?杭州通用型無血清細胞凍存液如何使用 希望本期的分享能夠為您的細胞培養過程...
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短,不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結果帶來了不穩定性。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化....
(一)細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液,4℃預冷(新鮮配制的凍存液會產生大量的熱);取對數生長期的細胞,用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來;懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中;離心1200rpm,6min;去除上清液,逐漸加入適量預冷的細胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間及操作人員姓名;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;到達-80℃時,則可迅速放入液氮中。細胞的凍存密度一般為?北京凍存細胞凍存...
如果將細胞暴露在這樣高溶質的溶液中且時間過長,細胞膜上脂質分子會受到損壞,細胞便發生滲漏,在復溫時,大量水分會因此進入細胞內,造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質損傷或稱溶液損傷。當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,產生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在很低溫條件下保存細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。杭州加完細胞凍存液的ph細胞類型...
紅細胞裂解液產品說明:紅細胞裂解液,為10X紅細胞裂解液,經過優化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液經過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。注意事項:對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘,但通常不宜超過15分鐘,并且裂解過...
細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。理論上儲存時間是無限的。無血清細胞凍存液好嗎?重慶通用型無血清細胞凍存液配制步驟每天換液,目測培養物以評估生長狀態直到下一次傳代。解凍復蘇后的6-7天,查看是否有適合傳代的(中心致密的)未分化的集落。注意:解...
根據細胞培養皿的大小加入適量細胞培養基后進行細胞常規培養。保存條件:4℃保存,有效期一年。若長不用可凍存于-20℃,有效期三年。產品質量:無血清細胞凍存液經過嚴格的內,滲透壓,pH檢測,并經過0.1um濾膜過濾,確保產品不含有細菌,支原體等污染。注意事項:1.請選擇對數生長期細胞進行凍存,由于DMSO對細胞有一定的損傷,凍存細胞分裝后應盡快轉移到-80℃冰箱,減少在室溫存放時間。如遇特殊情況,可先短暫放置于4℃并盡快轉移到-80℃冰箱。細胞凍存液取對數成長期的體細胞,除去舊細胞培養液,用PBS清理.通用型無血清細胞凍存液的區別細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛...
紅細胞裂解液 產品說明: 紅細胞裂解液,為10X紅細胞裂解液,經過優化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液經過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。 注意事項: 對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘...
根據細胞培養皿的大小加入適量細胞培養基后進行細胞常規培養。保存條件:4℃保存,有效期一年。若長不用可凍存于-20℃,有效期三年。產品質量:無血清細胞凍存液經過嚴格的內,滲透壓,pH檢測,并經過0.1um濾膜過濾,確保產品不含有細菌,支原體等污染。注意事項:1.請選擇對數生長期細胞進行凍存,由于DMSO對細胞有一定的損傷,凍存細胞分裝后應盡快轉移到-80℃冰箱,減少在室溫存放時間。如遇特殊情況,可先短暫放置于4℃并盡快轉移到-80℃冰箱。細胞凍存液一般有兩種配置方法是什么?吉林細胞凍存液用血清和培養基的區別一、細胞冷凍保存1.材料:生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO(SigmaD-2650...
細胞凍存簡介生物醫學科研實驗 1、培養室實驗準備工作大致同細胞傳代培養的前6個步驟。簡言之:用紫外消毒等消毒超凈工作臺面;清洗消毒手部;觀察細胞;預熱培養用液;點燃酒精燈;取出巴斯德吸管、刻度吸管等插在無菌試管內。 凍存液的配置方法:按如下比例配置:10%甘油+90%培養基,或者10%DMSO+90%培養基。用于配制凍存液的培養基中小牛血清濃度適量提高至20%或更高。所用的甘油需事先高壓滅菌,如使用DMSO,則不需要任何滅菌措施。 細胞凍存液主要成分是什么?廣州加完細胞凍存液是哪些物質用以下方法凍存細胞:4℃放置15-30分鐘(一定不能省略該步驟,否則凍存液無法完全滲透過細胞...
細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。理論上儲存時間是無限的。細胞的凍存密度一般是多少?bi 細胞凍存液一次加多少無血清細胞凍存液產品介紹:無血清細胞凍存液是一款針對細胞凍存和復蘇所研發的即用型細胞凍存液。該凍存液采用獨特的凍存配方,包括DMSO...
解凍解凍后,應該立即鋪板在預先包被好的培養皿中。開始之前,提前準備好以下材料:試管,恢復至室溫的培養基,預先包被的培養板,確保整個解凍復蘇程序可以在**短的時間內完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養基。1.在37°C水浴中快速解凍,持續溫和的在水中晃動凍存管,直到剩余少量細胞還處于結冰狀態。2.水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。3.用2mL的血清移液管把細胞懸液轉移到一個15mL的錐形試管。注意:用2mL的血清移液管代替1mL的***頭可以減少細胞聚集體的分解。細胞凍存液品牌有哪些?廣州凍細胞凍存液的區別細胞培養的傳代及日常維持過程中,在培養器具、培養液及各種準備工作方面都...
2.自體血漿制備:(1)取上半部分2/3的血漿層,放入50ml離心管中,56℃,滅活30min(2)取出離心管,放入-20℃靜置10min(3)取出離心管,4℃,1100g,離心15min(4)取出上面部分澄清血漿層,放入新50ml離心管中3.即用型凍存液配制:滅活后血漿:凍存液按照1:4比例混合,即可成即用型凍存液。(例:800微升凍存液加200微升滅***漿)4.離心后沉淀部分可使用分離液獲得高純度細胞。5.分離后得到的細胞按照上方凍存/復蘇流程進行操作。無血清快速細胞凍存液加入適量的細胞凍存液于離心管中,調節細胞濃度至1~5×106 /ml;武漢快速細胞凍存液使用說明 上海儒安生物科技...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃...
上海儒安生物科技有限公司抗體去除液 產品簡介: 蛋白印跡膜再生液,用于 Western blot中轉移了蛋白后膜的重復利用。在 Western blot 中完成了一 抗二抗結合和后續的化學發光檢測后,有時還需要檢測Actin 、Tubulin 等表達量相對穩定的蛋白作為參 照,或檢測其它蛋白進行比較。通過使用蛋白印跡膜再生液中特殊成份解離一抗二抗與印跡膜上抗原的結 合從而去除一抗二抗,即可非常方便地重新利用同一張膜檢測其它蛋白。與重新跑一個SDS-PAGE膠比較, 不但省時省力,而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,使可比性更強。 不含有常用的 bet...
血清這種富含營養成分的物質,可以直接支持細胞。Cell Applications公司的副總裁Daniel Schroen曾說道“當細胞處于這種營養豐富的環境時,它們能夠更好地復蘇”。其中,白蛋白是一種關鍵的組分,可在細胞周圍形成保護性的涂層。當細胞開始解凍時,血清也可以與釋放的***相結合。 DMSO 作用是取代細胞中的一些水,以防止冰晶形成,刺穿細胞。據賽默飛世爾科技的***科學家Rhonda Newman介紹,DMSO還能防止細胞在冷凍期間發生收縮,而后在解凍時又變得腫脹。 細胞凍存液的原理及配制方法?重慶加完細胞凍存液需要4度預冷注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等...
細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液...
紅細胞裂解液 產品說明: 紅細胞裂解液,為10X紅細胞裂解液,經過優化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液經過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續的原代培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。 注意事項: 對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘...
凍存細胞類型:人胚胎干(ES)和誘導多能干(iPS)細胞 ① hES和hiPS細胞凍存液,用于以TeSRTM培養基培養的細胞 ② 比使用血清凍存的傳統方法復蘇效率高1-4 ③ FreSRTM-S(新品)不含動物源成分,且已經過優化用于以單細胞懸液的方式凍存細胞 凍存細胞類型:間充質干細胞(MSCs) 用于預先培養于MesenCultTM-XF或者MesenCultTM-ACF(新品)培養基中的人MSCs 解凍的MSCs具有較高的復蘇效率、細胞成活率高、穩定性高可重復,且較好的保持了MSC的多能性和擴增能力 細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑.重慶新型...
希望本期的分享能夠為您的細胞培養過程提供凍存方面的幫助,同時我公司也能為您提供凍存液等凍存相關產品,與成熟的實驗技術指導,非常感謝您的支持! 產品訂購信息:品牌貨號產品描述包裝OriGenCP-70USP級 **DMSO二甲基亞砜,CE、USP、EP認證70mL/瓶, 6瓶/盒OriGenCP-10USP級 **DMSO二甲基亞砜10mL/瓶, 12瓶/盒OriGenCD-100DMSO/Dextran/remainder water 55%二甲基亞砜,5%右旋糖酐40混合液,CE、USP、EP認證100mL/瓶,6瓶/盒OriGenCD-50DMSO/Dextran/rema...
一、細胞冷凍保存?1.材料:? 生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO(Sigma?D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene?5000-0020)、0.4%(w/v)trypan?blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數盤與蓋玻片、等速降溫機(KRYO10SeriesII)? 2、冷凍保存方法:? (1)傳統方法:?冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-80℃16~18小時(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲存。? -20℃不可超過1小時,以防止胞內冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些...