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糞便總RNA快速提取試劑盒：獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的洗脫緩沖液將...

環(huán)狀RNA是一類產(chǎn)生于RNA剪切過程中的封閉喚醒RNA分子，主要由外顯子和（或）內(nèi)含子構(gòu)成。環(huán)狀RNA參與了復(fù)雜的RNA-RNA的相互作用網(wǎng)絡(luò)，在基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮作用；環(huán)狀RNA可直接與蛋白質(zhì)結(jié)合，也可通過RNA介導(dǎo)間接與蛋白質(zhì)發(fā)生關(guān)聯(lián)，影響蛋白質(zhì)功能；部...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：當(dāng)溫度進(jìn)一步下降，細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰，產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因?yàn)槔鋬霰Ｗo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合，從而降低冰點(diǎn)，減少冰晶的形成，并且通過其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度...

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：1、液氮內(nèi)的細(xì)胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細(xì)胞應(yīng)一段時間內(nèi)進(jìn)行更替。一個細(xì)胞系在培養(yǎng)一個月后，可復(fù)蘇一管新的細(xì)胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。2、細(xì)胞復(fù)蘇時，為保證獲得較高的存活率和接種率，應(yīng)...

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提取：堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以，若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu)，此法不可取...

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h。吸取0.0...

RNA提取試劑的選擇：首先，要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分，但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵，但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時，使用Takara公司的樣品保護(hù)劑Sample...

RNA提取關(guān)鍵點(diǎn)病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性，在提取時，實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴口罩和手套等各種防護(hù)裝備，以防實(shí)驗(yàn)室污染。而有種「自動滅活」的方法，在更加便利的同時，也能更好的保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase，這種酶也會加速RNA的降解。為了...

外泌體(exosomes，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天...

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：1、有文獻(xiàn)表明，細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙，因?yàn)檫@一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實(shí)際操作不可能將速度控制的這么精確，目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中。2、正...

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外）才能完成生長過程，而有一些細(xì)胞卻總是不太給力，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難，這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating），給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后...

總RNA提取試劑是一種快速從組織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于R...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA等多種物質(zhì)，存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體...

提取RNA的詳細(xì)步驟：首先，將研缽晾干夠，倒入1/3體積的液氮，加入0.2g均質(zhì)的植物材料，充分研磨后轉(zhuǎn)入一個含有300微升GMT的1.5ml的離心管中，搖勻。然后，加入30微升2mol/lNaAc進(jìn)行搖勻，加入300微升酸酚搖勻，加入100微升的氯仿?lián)u勻。然...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)...

拭子RNA提取試劑的選擇？應(yīng)有較高的提取得率。對離心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng)、洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果離心柱硅...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn)，博取眾家之長，根據(jù)多年來市場反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級和改良得來。具有操作步驟少，實(shí)驗(yàn)快捷，RNA產(chǎn)量純度高，充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要，適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量：每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不...

細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”，這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性；緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快...

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)...

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒：1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù)，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，R...

外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史，近幾年，將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前，市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見的是Syste...

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對于大多數(shù)動物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的...

新型土壤總RNA快速提取試劑盒：獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的洗脫緩沖...

細(xì)胞凍存：取出凍存管，注明細(xì)胞名稱，代數(shù)，日期。離心后，以無菌吸管吸棄上清，不要吸到底部的細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀與凍存液充分混勻，根據(jù)計數(shù)結(jié)果，將細(xì)胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細(xì)胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細(xì)胞凍存懸液分裝進(jìn)細(xì)胞凍存管中，一般2ml的凍存管中裝入1-1...

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理，收集上清液；在冰水浴中，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀2.用0.03...