自制染色干燥細胞外基質膠:目的研究自制染色干燥細胞外基質膠羊膜(extracellularmatrixamnioticmembrane,ECM-AM)的生物活性因子表達情況、生物力學特征以及在兔結膜修補術中的應用效果。方法使用光鏡和HE染色對自制染色干燥ECM...
外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生...
外泌體(exosomes,Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,實現細胞之間的信息交流及物質交換,并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天...
無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項:1.將分裝好的細胞凍存管,直接置于-80度冰箱過夜保存,次日投入液氮中保存即可備注:1、凍存過程中,第2步在冰袋附近操作時,低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復蘇過程中有可能會炸(1)提...
腦組織分離方法簡述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進行消化,經水浴、反復輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中,混勻,置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程,包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體,用重懸...
細胞外基質和膠原的結構:膠原(collgen)的結構:在膠原纖維中,膠原的分子單位稱為原膠原,由3條多肽鏈組成3股螺旋結構,相對分子質量約30萬左右,長達300nm,而直徑為1.5nm。原膠原分子中每隔64~70nm即有易于染色的極性部位存在,而在膠原微纖維中...
外泌體相關蛋白質與肺病的診斷:近年來眾多文獻報道,肺病細胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質并促進肺病的發生的發展,是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發現,NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%,...
外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。功能:當外泌...
細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養液.細...
胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3.取相當于所需細胞數的細胞懸...
細胞外基質(ECM)和骨骼肌:當肌肉組織受傷時,肌肉自然震顫功能受阻,淋巴管和血管無法把細胞外基質中玻尿酸產生的酸性物質帶走,引發代謝受阻的同時,細胞外基質內的PH值也會隨著酸堿失衡的環境逐漸變低,直接影響細胞產生ATP。隨著代謝受阻及細胞外基質內環境的變化,...
細胞外基質蛋白聚糖(proteoglycan):蛋白聚糖是氨基聚糖(除透明質酸外)與*蛋白質(coreprotein)的共價結合物。*蛋白質的絲氨酸殘基(常有Ser-Gly-X-Gly序列)可在高爾基復合體中裝配上氨基聚糖(GAG)鏈。其糖基化過程為通過逐個轉...
細胞外基質成分居然能調節葡萄糖代謝過程:確認ECM組分透明質酸與新陳代謝之間的機制聯系,用透明質酸酶處理細胞和異種移植物引發糖酵解的強烈增加。這主要通過快速受體酪氨酸激酶介導的mRNA衰變因子ZFP36的誘導來實現,其靶向TXNIP轉錄物以降解。因為TXNIP...
凍存細胞注意事項:冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。注:DMSO可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。...
細胞可以通過施力和測量產生的反作用力來感知環境的機械特性。這發揮著重要作用,因為它有助于調節許多重要的細胞過程,包括細胞收縮,細胞遷移,細胞增殖,分化[和細胞死亡(凋亡)。克制非肌肉肌球蛋白ⅱ阻斷了大部分這些效應,表明它們確實與細胞外基質的機械特性有關,這在過...
細胞凍存和復蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內冰晶的產生,從而使細胞產生內源性的機械損傷,引起細胞內環境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細胞培養液.細...
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于細胞培養上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取...
細胞凍存的注意事項:1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些,骨髓干細胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細胞耐受性較小,不宜太快。總之在一開始時,下降速度不能超過-10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大,要依細胞而定,初代培養...
細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現用現配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環境中保存。使用...
目前的主流觀點認為,外泌體的產生過程為:細胞膜內陷,形成內體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細胞的多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體較早見于198...
植物細胞的細胞壁相當于植物體中的細胞外基質。細胞外基質主要由5類物質組成,即膠原蛋白、非膠原蛋白、彈性蛋白、蛋白聚糖與氨基聚糖,其在上皮或內皮細胞的基底部者為基底膜,而在細胞間黏附結構者為間質結締組織。細胞外基質的化學組成包括3類:氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈...
蛋白聚糖在細胞外基質中的功能是什么:蛋白聚糖的這種性質,使細胞表面具有較大的可塑性,從而具有抗擠壓能力,對細胞起保護作用。由于透明質酸以可溶的形式游離存在,所以在細胞外體液和滑液(synovialfluid)中透明質酸的濃度很高,其結果提高了體液和滑液的粘度和...
凍存細胞注意事項:冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。注:DMSO可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。...
外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強地滯留...
細胞質基質(cytoplasmicmatrix;cytoplasmicgroundsubstance;groundplasm)是除去能分辨的細胞器和顆粒以外的細胞質中膠態的基底物質,現又稱細胞溶膠。蛋白聚糖的主要成份是糖胺聚糖,是由重復二糖單位構成的無分支長鏈...
凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳...
復蘇方:法1)從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養細胞(參考離...
無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優勢:傳統的細胞凍存液是使用培養基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了...
可以。為了能夠高效提取細胞培養上清中的外泌體,磁珠可重復使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收,提取時可進行反復抽提,提高提取效率。用血液樣品進行實驗時,需要根據磁珠狀況來判斷是否能重復利用;若...